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1、黄连素的抗炎作用及其机制苞政甄'磷?434?中国药理学通报ChinesePharraacologicalBulletin1998Oct;14(5):434～7～j7R黄连素的抗炎作用及其机制尺77/?/_盟婴尔逊江.托卡依刘发(新疆医科大学基础医学部药理学教研室人体解剖学教研室,乌鲁未齐830054)中国圈书分类号R282.1}R971.1'R979.5摘要目的探讨黄连素抗炎作用及其机制.方法(采用中性粒细胞趋化法,化学发光法微酸滴定法和紫外分光光度法等,从细胞和分子水平观察黄连素(berbefiae,Ber)对中性粒细胞及几种重要炎症介质的影响结果5×10,5×10叫mol?L叫明显抑制
2、趋化固子zAP(zymosan—activitedplasma)诱导的中性粒细胞趋化}抑制多形棱白细胞酵母多糖诱导的化学发光{对白细胞系产生的羟自由基及过氧化氢导致的化学发光亦有显着的抑制作用;明显降低中性粒细胞中磷脂酶Az(PLA2)的活性.在整体实验中,Bet30,60,90mg?kg～,ig,可明显降低大鼠炎症组织中PGE:的含量.结论Bet的抗炎作用可能与抑制中性粒细胞趋化,产生活性氧的功能,抑制自由基产生,降低PLA.活性,减少炎症组织中PGE:的产生等多因素有关.关键词趋化性;化学发光{磷脂酶A;前列腺素E黄连素是从黄连根茎中提取的一种季铵类化合物.l临床上作清热,解毒,抗菌类
3、药物应用.黄连素在心血管,传出神经系统及治疗糖尿病等领域都有肯定的作用":.近年来,黄连素的抗炎免疫药理作用逐渐引起人们的注意.本室耿东升等研究认为,黄连素可增强小鼠非特性免疫,抑制细胞和体液免疫0.本文对黄连素的抗炎作用及其机制进行试验研究目的在于充实和完善对黄连素的基础研究,为临床应用提供药理学依据.1实验材料1.1药品与试剂盐酸黄连素(berberinehy—drochloride,Ber),东北制药厂提供,批号:93一O9—187,用前以相应缓冲液配成合适浓度.角叉菜胶(carrageenin),辽宁省药物研究所产品.环磷酰胺(cycl0ph∞phamide),上海第十二制药厂产品
4、.鲁米诺(1uminol,氨基苯二酰一肼),德国E?Merck产品.酵母多糖(zymosan),美国Sigma公司产品.人血,乌鲁木齐中心血站健康志愿者提供.新生小牛血1997-07—16收稿.1997—12-2l修回新疆军区药材库,乌鲁木齐,830002作者简介:蒋檄扬.男,26岁,硬士.讲师;刘发.男.62岁,教授,硕士生导师,中国药理学告常务理事清(newborncalfserum,NCS),新疆种牛场出品,用前56℃灭活30min1.2仪器二氧化碳培养箱,MCO96型,日本SANYOElecticCoLtd产品.液闪仪,LKB一1217型Finland产品.75—1型可见紫外分光光
5、度仪,上海第三分析仪器厂产品.倒置显微镜,重庆光学仪器厂产品.1.3动物Wistar大鼠,新疆流行病研究所动物室提供.生产证号:新医动字(94)一16001号.2实验方法和结果2.1对中性粒细胞琼脂糖趋化实验的影响.采用右旋糖酐沉淀法从健康成人抗凝血中提取.检查细胞存活率>0.95以上,调整白细胞浓度5x10?L备用.依文献"制备琼脂糖凝胶玻片.趋化因子制备(zAP);酵母多糖以生理盐水清洗数次,加入新鲜制备的大鼠血清,酵母多糖终浓度为10g?L～,37℃孵育1h,离心去酵母上清即为ZAP,储存于一2Oc备用,取上述白细胞悬液分为5组,分别加入Per终浓度为5×10～,5×10一,5
6、×10tool?L-.,地塞米松终浓度为5x10mol?L_.,对照组加入等量的RPMI1640培养液,37C孵育1h,150Xg离心5min,弃上清,加入等量的RPMI1640培养液,再次混悬白细胞,向制备琼脂糖凝胶玻片的各孔加入白细胞悬液,趋化因子ZAP,等量的RPMI1640培养液1o1,37℃CO培养箱中孵育12h.在倒置显微镜用测微尺准确测定白细胞随机运动扩散距离及趋化性运动距离.并计算抑制百分率:(对照组扩散距离一实验组扩散距离)/对照组扩散距离×结果,Per5x10～,5x10tool?L可明显抑制白细胞趋化性运动,5x10tool?L可明显抑制白细胞随机运动(表1).2.2
7、对多形核白细胞呼吸爆发化学发光的影响多形核白细胞(PMNs)从角叉菜胶诱导的大鼠急性胸膜炎中提取制备,调整多形核白细胞数至4×1O.?L备用.瑞氏染色,细胞分类,其中PMNs>09,以台盼蓝作活力测定,活细胞数>0.95.以同种大鼠血清调理酵母多糖后,酵母多糖以375g?L再混悬于Hanks液中备用.取制备的PMNs0.5中国药理学通报ChineseP&删c.gfBulletin1998OctF14(
