猪圆环病毒2型cap蛋白主要抗原表位重组复制缺陷型腺病毒的黏膜免疫效果评价

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1、河南农业大学硕士学位论文猪圆环病毒2型Cap蛋白主要抗原表位重组复制缺陷型腺病毒的黏膜免疫效果评价姓名：刘雨丰申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：陈陆；赵军201205河南农业大学2012届硕士毕业论文摘要猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2，PCV2)是引起圆环病毒相关疾病(Porcinecircovirus．associateddisease，PCVAD)的主要病原体，该病己给世界养猪业带来了巨大的经济损失。本研究评价了猪圆环病毒2型Cap蛋白主要抗原表位重组复制缺陷型腺病毒(rAd

2、／Cap／518)的黏膜免疫效果。将rAd／Cap／518分别经滴鼻、肌内和口服三种途径免疫小鼠，无外源基因的空腺病毒(wild．tAd)经滴鼻途径免疫作为对照组。结果显示，rAd／Cap／5]8经肌内和滴鼻途径免疫诱导的血清IgG抗体水平与对照组抗体水平相比显著增加(P

3、免疫诱导的CD4+T细胞显著增加(P

4、配合黏膜免疫佐剂将有可能增强免疫应答效果。本文选择了含非甲基化CpG基序(CpGODN)、霍乱菌素B单位(CTB)和多聚肌胞苷酸(Poly(I：C))三种免疫佐剂分别联合rAd／Cap／518经滴鼻途径免疫小鼠，结果表明rAd／Cap／518分别联合CpGODN和CTB免疫诱导的血清IgG抗体水平和局部黏膜部位IgA抗体水平显著高于rAd／Cap／518单独免疫组(P<0．05)，而tAd／Cap／518联合Poly(I：C)免疫后没有增加体液免疫应答效果(P

5、鼠体内T细胞亚群均显著增an(P<0．05)，同时CD4+T细胞内IL．2和CD8+T细胞内IFN-7的含量高于rAd／Cap／5]8单独免疫组；攻毒后各免疫小鼠体内病毒载量与rAd／Cap／518单独免疫相比均进一步降低。本研究我们证明了rAd／Cap／518经滴鼻免疫能诱导全身性和局部黏膜部位PCV2特异性体液免疫应答和Thl型细胞免疫应答。rAd／Cap／518联合CpGODN和CTB佐剂能显著提高PCV2特异性体液和细胞免疫应答，而rAd／Cap／518联合Poly(I：C)佐剂仅能提高PCV2特异性细胞免疫应

6、答效果。关键词：猪圆环病毒2型；rAd／Cap／518；黏膜免疫；CpGODN；CTB：Poly(I：C)第1页共58页河南农业大学2012届硕士毕业论文MUCOSAL皿删MUNERESPONSE矾DUCEDBYRECOMBINANTADENOvTRl7SESEXPRESSINGTHEMAJOREPITOPESOFCAPSIDPROTEINOFPORCINECIRCOVIRUSTYPE2Supervisor：ChenlUMasterCandidate：Liuyu—fengABSTRACT：Porcinecircovir

7、ustype2(PCV2)iStheprimarycausativeagentofpost．weaningmulti．systemicwastingsyndrome(PMWS)．Westudiedtheimmuneresponsesinducedbyrecombinantadenovirusesexpressingthemajorepitopesofcapsidproteinofporcinecircovirus2(rAd／Cap／518)inmicemodel．BLAB&micewereimmunizedwithra

8、d／Cap／518throughintranasal，intramuscularororalroute．MiceimmunizedwithrAd／Cap／518throughintranasalandoraIroutescaninduceserumIgGAbsandhightitersofmucosalIgAAbsinsaliva