生物化学实验原理与方法

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1、生物秀—专心做生物【www.bbioo.com】易生物—实验室问题解决伙伴【www.ebioe.com】生物化学实验生物化学实验原理与方法原理与方法生物秀论坛—学术交流、资源共享、互助社区【www.bbioo.com/bbs】生物秀下载频道【www.bbioo.com/soft】生物秀—专心做生物【www.bbioo.com】易生物—实验室问题解决伙伴【www.ebioe.com】n第一章：第一章：生物生物化化学物质学物质的的制备制备n第二章：第二章：离心离心技术技术n第三章：第三章：层析层析技术技术n第四章：第四章：电泳电泳技术

2、技术n第五章第五章：：基因基因克克隆技术隆技术n第六章：第六章：PPCRCR技术技术n第七章第七章：：生物生物芯芯片技术片技术生物秀论坛—学术交流、资源共享、互助社区【www.bbioo.com/bbs】生物秀下载频道【www.bbioo.com/soft】生物秀—专心做生物【www.bbioo.com】易生物—实验室问题解决伙伴【www.ebioe.com】第一章第一章::生化生化物质的物质的制备制备n生化物质通常是指动物、植物和微生物进行新陈代谢时产生的蛋白质（包括酶）和核酸等有机化合物。这些大分子物质在生物体内具有各种生理活

3、性，这些活性的产生与其结构有着密切关系，因此，分离此类物质不能用一般的化学分离方法，而是采用比较特殊的方法。这些方法与一般的化学分离方法相比，有下列几个特点：n1、生物材料组成非常复杂。其中包括数百种甚至数千种化合物，并且在分离过程中，这些化合物仍在发生代谢变化，如蛋白质和核酸的水解。n2、有些化合物的含量极微，如激素等。n3、许多具有生物活性的物质一旦离开活体，很易变变性破坏，因此常选用比较温和的条件进行制备。n4、生化分离制备几乎都在溶液中进行，影响因素很多，实验方法经验性较强。生物秀论坛—学术交流、资源共享、互助社区【www

4、.bbioo.com/bbs】生物秀下载频道【www.bbioo.com/soft】生物秀—专心做生物【www.bbioo.com】易生物—实验室问题解决伙伴【www.ebioe.com】第一第一节节：：生物生物材料材料的的选择选择n选择生物材料的原则：有效成分含量多，稳定性好；来源丰富，保持新鲜；提取方法简单；有综合利用价值等。n生物材料一般可以分为两大类：天然生物材料和人工生物材料。n天然生物材料一般是指在自然界易采集的、目的物含量较高的生物个体、器官或组织。n人工生物材料又分为三种：1、新品种材料2、组织培养材料3、生物产品

5、与生物制品材料生物秀论坛—学术交流、资源共享、互助社区【www.bbioo.com/bbs】生物秀下载频道【www.bbioo.com/soft】生物秀—专心做生物【www.bbioo.com】易生物—实验室问题解决伙伴【www.ebioe.com】第二第二节节：：细细胞及胞及组组织织的的破破碎碎n细胞及组织破碎的方法多种多样，根据实验目的和材料的不同可以采用不同的细胞破碎方法，细胞破碎方法大致可以分为四类：n机械破碎：研磨法；组织捣碎法；超声波法；压榨法；冻融法n溶胀和自溶溶胀：细胞膜为天然的半透膜，在低渗溶液如低浓度的稀盐溶液

6、中，由于存在渗透压差，溶剂分子大量进入细胞，引起细胞膜发生胀破的现象。自溶：细胞结构在本身所具有的各种水解酶如蛋白酶和酯酶等作用，发生溶解的现象。n化学处理用脂溶性的溶剂（如丙酮、氯仿、甲苯）或表面活性剂（SDS）处理细胞时，可以把细胞壁、细胞膜的结构部分溶解，进而使细胞释放出各种酶类物质，并导致整个细胞破碎。n生物酶降解生物酶有降解细菌细胞壁的功能，在用此法处理细胞时，先是细胞壁降解，随之而来的是因渗透压差引起的细胞膜破裂，最后导致细胞完全破碎。生物秀论坛—学术交流、资源共享、互助社区【www.bbioo.com/bbs】生物秀

7、下载频道【www.bbioo.com/soft】生物秀—专心做生物【www.bbioo.com】易生物—实验室问题解决伙伴【www.ebioe.com】第三第三节节：生：生物分子的物分子的提取提取n提取是在分离纯化前期，将样品研磨，把被破碎的细胞置于一定的溶剂（提取液）中，使某一类分子目的物释放到提取液中的过程。提取液应具备的条件：对有效成分溶解度大，破坏作用小；对杂质溶解度小或不溶解；来源广泛、价格低廉、操作安全等。n生物分子可以分为生物大分子和生物小分子。生物小分子的结构由较强的共价键决定；生物大分子中除共价键外，还含有较弱的

8、共价键和次级键，故需温和的条件才能保证生物大分子的活性不被破坏。因此，这两类生物分子的提取液成分和操作条件差别很大。n1、生物小分子的提取n2、生物大分子的提取蛋白质和酶的提取核酸的提取生物秀论坛—学术交流、资源共享、互助社区【www.bbioo.