生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

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1、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 1．实验原理可溶性糖中的还原糖（葡萄糖、果糖）与斐林试剂作用生成砖红色沉淀；脂肪被苏丹Ⅲ溶液或苏丹Ⅳ溶液染成橘黄色或红色；蛋白质与双缩脲试剂发生作用，能产生紫色反应。2．材料用具做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量高，颜色为白色或近于白色的植物组织，以苹果、梨为最好，使实验效果明显；做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪含量高的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3~4h；做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1~2d的黄豆种子（或用豆浆），或用蛋清（必须稀释10倍后再使用

2、）。3．实验试剂由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液刚配制而成的斐林试剂；苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ溶液；双缩脲试剂。4．实验过程可溶性糖的鉴定：注意：蛋白质的鉴定在试剂使用上与还原糖鉴定不同的是，先加入质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液，造碱性环境，观察颜色变化后再加入3~4滴质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液，而不是混合使用。讨论：（1）用斐林试剂鉴定可溶性糖（还原糖）时，溶液的颜色变化为什么是浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）？（提示：棕色为浅蓝色与砖红色的

3、混合色）（2）鉴定可溶性还原糖试验中，苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的颜色反应最明显的是哪一种？（提示：经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜）在［实验1］生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但两者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.01g/mL。（2）使用原理不同。斐林试剂

4、实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。（3）使用方法不同。斐林试剂使用时，先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。双缩脲试剂使用时，先加入NaOH溶液，然后再加入CuSO4溶液。