迷迭香叶中鼠尾草酸的分离纯化及其生物活性研究

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1、中国肄鸳斜学印宪陀学位论文万方数据学位论文作者指导教师姓名指导小组成员申请学位级别专业名称研究方向论文答辩日期夏田娟毕良武研究员赵振东研究员陈玉湘研究员李冬梅高级实验师硕士林产化学加工工程天然资源化学与利用2015年6月◎中国·北京万方数据DissertationfortheDegreeCandidate：Supervisor：AssociateSupervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：DateofDefence：XiaTianjuanProf．BiLiangwuProf．ZhaoZhendongProf．ChenY

2、uxiangSeniorExperimentalistLiDongmeiMasterChemicalProcessingEngineeringofForestProductsJune2015Degree--conferring--institution：ChineseAcademyofForestry万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的

3、同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：趸羽圣置日期：刀侈年7月弓日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定，中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：夏，安与≯f歹年7月≥日学位论文作者毕业联系方式工作单位：联系电话：电子邮件：通讯地址、

4、邮编：导师签名：加fs年7其怖亩3日万方数据摘要迷迭香(RosmarinusofficinalisL．)作为一种广泛分布的药用植物，其叶中含有多种生物活性物质，其中鼠尾草酸具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、保护中枢神经系统、护肝护胃、降低血糖血脂等一系列重要的药理和生物活性，在食品、医药保健、化妆品和香料等方面具有广泛的应用。本文以迷迭香叶为原料，研究了迷迭香叶中鼠尾草酸的分离纯化工艺。同时，通过自由基清除能力、还原力和平板二倍稀释法实验，评价了鼠尾草酸的抗氧化活性、抑菌活性。以迷迭香叶为原料，采用3步骤复合提取纯化方法制备鼠尾草酸，第一步：迷迭香叶经超声辅助乙醇提取，

5、得到迷迭香提取物；第二步：迷迭香提取物经超声辅助正己烷提取和pH调节，得到鼠尾草酸粗品；第三步：鼠尾草酸粗品经硅胶柱层析，得到鼠尾草酸纯品。单因素试验的结果表明：第二步操作的合理条件为：液固比20：1(mL／g)、超声频率28kHz、超声时间40min、超声功率140W；第三步操作的合理条件为：200～300目的硅胶40g、洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚=4：7(v／v)、洗脱剂流速6mL／min、负载量为O．3g。通过此种方法得到的鼠尾草酸纯度≥95％。然后，在三步法的基础上探索两步法分离纯化鼠尾草酸。以迷迭香叶为原料，采用两步法分离纯化鼠尾草酸，第一步：迷迭香叶经超声辅

6、助乙醇提取，得到迷迭香提取物；第二步：迷迭香提取物经硅胶柱层析，得到鼠尾草酸纯品。单因素试验的结果表明：第二步操作的合理条件为：200～300目硅胶50g、洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚=4：13(v／v)、洗脱剂流速4mL／min、负载量为0．5g。通过此种方法得到的鼠尾草酸纯度≥97％。同时，对实验所得物质进行紫外、红外、核磁、质谱验证，证明所得物质为鼠尾草酸。采用当前公认的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和铁还原力3种体外抗氧化活性检测与评价方法对鼠尾草酸与多种常见的合成抗氧化剂的抗氧化性能进行比较。结果表明：鼠尾草酸具有比合成抗氧化剂PG、BHT、BH

7、A，VE更好、仅次于TBHQ的抗氧化性能，可在较低的浓度水平发挥较强的抗氧化能力，其清除DPPH自由基的IC50值为2．53pg／mL，清除ABTS自由基的IC50值为51．58gg／mL。万方数据通过平板二倍稀释法对鼠尾草酸与常见的3种抗菌剂新洁尔灭(苯扎溴铵)、氨苄青霉素钠、红霉素对6种不同菌种的最低抑菌浓度进行测试和评价。抑菌实验表明：鼠尾草酸具有广谱抗菌性，特别是对大肠埃希氏杆菌、绿脓假单胞菌，其最低抑菌浓度分别为4和<2gg／mL，表现出了比新洁尔灭、氨苄青霉素钠、红霉素更好的抑菌活性；对于肺炎克雷伯氏菌，则表现出了与红霉素同样的抑菌效果，