mincle在大鼠角膜上皮抗烟曲霉菌感染固有免疫阶段作用的研究

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1、Mincle在大鼠角膜上皮抗烟曲霉菌感染固有免疫阶段作用的研究摘要目的：观察巨噬细胞诱导型c型凝集素因子(monocyte—inducibleC—typelectin，mincle)在大鼠角膜上皮抗烟曲霉菌固有免疫阶段的表达情况，探讨其在真菌性角膜炎固有免疫中的作用。方法：清洁级Wistar大鼠72只，随机分为烟曲霉菌感染组，阴性对照组，空白对照组，取右眼为实验眼，在刮除大鼠角膜上皮后涂以烟曲霉菌菌丝并覆盖自制的角膜接触镜，建立大鼠角膜真菌感染模型，分别于4、8、16、24小时观察大鼠角膜变化情况。采用HE染色观察角膜组织学变化，分别采用Real—timeRT—PCR技术免疫组

2、织化学及免疫荧光方法检测角膜上皮mincle受体及炎性因子mRNA及蛋白表达情况。结果：造模后4小时角膜轻度水肿，随着时间的延长，角膜病变逐渐加重，24小时形成溃疡。MinclemRNA在正常对照组、损伤各组均有表达，在曲霉菌感染组mincle的表达量明显上升，在16h达到高峰，各时间点比较差距具有统计学意义(p

3、1、组织病理学观察和真菌培养证实大鼠烟曲霉菌性角膜炎模型建立成功。2．mincle受体在正常大鼠角膜上皮中存在，烟曲霉菌刺激后可引起表达上调。3．TNF—a、IL—lB、IL-6、IL-IO、CCL2、CCL3、CXCLl、CXCL2在大鼠角膜上皮中存在，且烟曲霉菌刺激后表达上调。4．mincle与TNF—a、IL一1B、IL一10、CCL3间存在明显相关，mincle可能作为模式识别受体参与大鼠真菌性角膜炎的固有免疫阶段。硕士研究生陈文俊(眼科学)指导教师赵桂秋教授关键词：mincle；固有免疫；角膜上皮；曲霉菌TheroleofmincleininnateimmuneofA

4、spergillusFumigatusKeratitisinRatsAbstractlIIIIIIIllllllllllllllllllJllllllllllllllPtlllY2338223Objective：ToinvestigatetheearlyexpressionofmacrophageinducibleC．typelectinthefactor(mincle)ofepitheliuminratfungalkeratitis，andanalyzeitsroleintheinnateimmuneresponseoffungalkeratitis．Methods：Fung

5、alkeratitiswasestablishedbyscarifyingthecornealepitheliumofWistarratsfollowedbytopicalapplicationofAspergillusfumigatus(Af)．4，8，16，and24hourspost-infection，theinflammatoryresponsesandcorneallesionswereobservedbyslit．1ampmicroscope．Reversetranscription(RT)andquantitativereal-timepolymerasecha

6、inreaction(Real-timePCR)，immunohistochemistry,andimmunofluorescencewereusedtodetecttheexpressionofmincleinthecorneaepitheliumofrat．Theexpressionofeightcytokines，cytokine—inducedneutrophilchemoattractant(CXCL1，CXCL2)，interleukin(IL_1p，IL一6，IL-10)，tumornecrosisfactora(TNF-a)，chemokine(C—Cmotif

7、)ligand(CCL2，CCL3)，weredeterminedbyReal．timeRTPeRandimmunohistochemistry．Result：Thecornealesionsgraduallyworsened，andtheulcercouldbebecame24hafterinfection．Comparedtothescarifiedcontrolgroup，theexpressionofminclewasupregulatedsignificantlyat4，8，16，