mmp-9在去势大鼠正畸牙齿压力侧牙槽骨表达的研究

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1、河北医科大学硕士学位论文MMP--9在去势大鼠正畸牙齿压力侧牙槽骨表达的研究姓名：李静申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学指导教师：马文盛201203中文摘要MMP．9在去势大鼠正畸牙齿压力侧牙槽骨表达的研究摘要目的：建立去势大鼠骨质疏松的实验动物模型，对去势大鼠和正常大鼠牙齿施加正畸力，观察并比较基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinase．9，MMP．9)在两种大鼠正畸移动牙齿压力侧牙周膜中的表达的区别，探讨MlVIP一9与正畸牙齿移动压力侧牙槽骨吸收的关系，以及骨质疏松对正畸力作用下骨代谢的影响。方法：6月龄Wistar大鼠50只按体重随机分为10组，即对照组

2、：A1组(加力0天)、A2组(加力5天)、A3组(加力7天)、A4组(加力1O天)、A5组(加力14天)；去势组：B1组(加力0天)、B2组(加力5天)、B3组(加力7天)、B4组(加力1O天)、B5组(加力14天)。每组5只。切除去势组大鼠双侧卵巢，造成雌激素缺乏的骨质疏松实验动物模型，对照组大鼠只切除卵巢周围的小块脂肪组织，不切除双侧卵巢。术后饲养6个月后于各组大鼠上颌第一磨牙与中切牙间安装钛镍螺旋弹簧，打开弹簧使其产生约0．49N的拉力，牵引上颌第一磨牙向近中移动，建立正畸牙齿移动的动物实验模型。在预定的时间切取各组大鼠左后肢股骨、胫骨及椎骨，使用双1fl‘“r,X线骨密度检测仪

3、，应用小动物软件测定其骨密度。切取大鼠双侧上颌骨标本(包括上颌磨牙和牙周组织)，固定，脱钙，包埋、切片，HE染色观察移动牙齿压力侧牙周组织的形态学变化；抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察压力侧牙周组织中破骨细胞的数目；免疫组化染色观察移动牙齿压力侧牙周组织中MMP．9表达的变化，应用图像分析软件ImagePro．plus6．0对MMP一9的含量进行半定量分析。采用SPSSl8．0统计软件对所有实验结果进行统计学分析，若资料服从正态分布，采用均数(Ⅳ)和标准差(S)进行描述，若资料不服从正态分布，采用中位数(M)和四分位数间距(Q)进行描述。统计推断时，服从正态并方差齐，采用两独立样本比较的t检

4、验进行统计分析；反之，则采用两独立样本比较的Wilcoxon秩和检验进行统计分析。检验水准a=O．05。中文摘要结果：1骨密度测量结果：去势组大鼠切除双侧卵巢6个月后，测量其左后肢胫骨、腰椎(L2,---L4)和股骨骨密度的测量值分别为O．14士0．01、o．17+0．01和O．18+0．01，对照组左后肢胫骨、腰椎(L2～L4)和胫骨骨密度的测量值分别为0．15-4-0．01、0．21-4-0．01和0．20-3：0．02，且P<0．05，去势组各组骨密度值高于对照组，去势组与对照组各组间差异具有统计学意义。2HE染色结果：对照组未加力大鼠牙周膜宽度正常，成纤维细胞数量、排列正常，牙

5、周膜纤维排列规则有序，牙槽骨边缘连续且无明显的骨吸收及骨新生现象。对照组加力7天、10天、14天大鼠移动牙齿压力侧牙周膜较未加力组明显变窄，成纤维细胞数量减少，牙周膜纤维排列紊乱；加力5天组矛1：17天组偶见无细胞结构的玻璃样变组织以及直接的骨吸收，随着加力时间延长可见潜掘性的骨吸收，加力10天后玻璃样变组织逐渐被清除。去势组未加力大鼠牙周膜宽度正常，牙周膜纤维部分排列紊乱，骨小梁变薄变窄。去势组加力7天、10天、14天大鼠移动牙压力侧牙周膜变窄，血管数量增加，牙周膜内成纤维细胞排列更加紊乱；牙槽骨骨小梁变窄变薄，骨髓腔增大，破骨细胞增多；在加力10天组和14天组压力侧牙周膜内偶见玻璃

6、样变组织，加力5天组和7天组未见玻璃样变组织。3压力侧牙周组织中破骨细胞TRAP染色结果：去势组和对照组大鼠移动牙齿压力侧牙周组织中TRAP染色呈阳性的破骨细胞数量在受力后均增多。结果显示在加力0天、5天、7天、10天时去势组与对照组各组间差异有统计学意义(pO．05)，在相同加力时间点上去势组破骨细胞数都多于对照组。4压力侧牙周组织中MMP．9的表达：MMP．9阳性着色部位主要位于牙周膜成纤维细胞、破骨细胞、单核巨细胞(破骨细胞前体)和巨噬细胞的胞浆。结果显示在加力0天、5天、7天、10天、14天时去势组与对照组

7、各组间差异均有统计学意义(p