人纤维环细胞与骨髓间充质干细胞transwell共培养研究

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1、分类号：密级：单位代码：10114学号：201030950人纤维环细胞与骨髓间充质干细胞Transwel1共培养研究研究生：毯明指导教师：旦迅(教援)申请学位门类级别：医堂亟±专业名称：生[型堂研究方向：登挂遣煎塑鱼所在学院：笠三!鱼废医堂医2012年3月10同学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师王东教授指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明

2、并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授f的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公丌道歉。4、本人负责凶论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：涨佣同期：堡堡年二王月』生同学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文

3、和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)沦文作者签名：指导教师签名：闷期：兰垒年三月—／—oHn期：翌!三年二L月丛L只(本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用)目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．I中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯I英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅱ英语缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ⅳ前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯I‘日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一部分实验材料与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4第二部分实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61实验路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73观察内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯g．第三部分实验结果⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．10第四部分讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11第五部分结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27人纤维环细胞与骨髓间充质干细胞TranswelI共培养研究中文摘要背

6、景：椎问盘退变常引起颈肩痛和腰腿痛。常用的手术治疗方法虽可提供良好的短期疗效，但手术改变了脊柱的生物力学，导致相邻樵问盘的进一步退变。因此，寻找可在椎问盘退变早期进行干预并维持脊柱生物力学的组织工程修复方法，成为目前研究的焦点。骨髓问充质干细胞(BMSCs)更是成为研究椎问盘退变修复的干细胞治疗的热点。纤维环(AF)是椎问盘的重要组成结构，其结构和功能的完整性在椎问盘退变防治中有着重要意义。目的：探讨人的纤维环(AF)细胞与骨髓洲充质干细胞(BMSCs)在Transwell共培养后，对AF细胞的细胞增殖和细胞外基质合成的影响，以及BMSCs是否具有向AF细胞分化的

7、能力。方法：分别对5例年龄在40岁以下脊柱手术病人的纤维环组织和骨髓标本进行分离、培养AF细胞和BMSCS，分别吸取第三代的AF细胞矛IIBMSCs，按1：l的细胞比例分别植于Transwell共培养系统中，下室植入BMSCs，卜．室植入AF细胞。并且建立3个细胞培养组，即BMSCs与AF细胞共培养组(实验组)，BMSCs单独培养组矛llAF细胞单独培养组作为对照组。培养3周后，运用倒置相差显微镜观察细胞的形态变化；分别用HE染色、I型胶原免疫组化染色和流式细胞仪对两种细胞鉴定：运用荧光定量PCR法检测各细胞培养组蛋白聚糖Aggrecan、I型胶原蛋白mRNA及S

8、ox9的表