植物多糖分析检测研究进展_张忠华

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1、第31卷第7期吉林化工学院学报Vol．31No．72014年7月JOUＲNALOFJILININSTITUTEOFCHEMICALTECHNOLOGYJul．2014文章编号:1007-2853(2014)07-0033-05植物多糖分析检测研究进展1，21*张忠华，高维平(1．吉林化工学院化学与制药工程学院，吉林吉林132022;2．吉林大学化学学院，吉林长春130021)摘要:植物多糖在药理、农业、食品等领域具有独特的作用，尤其是在药理方面有很好的发展前景．近年来，国内外越来越多的人在进行深入研究．本文主要探

2、讨了国内外植物多糖检测现状，并提出了规范性建议，为今后多糖检测标准建立奠定基础．关键词:植物多糖;分析检测;质量标准中图分类号:O614．23文献标志码:A多糖又称多聚糖，是由单糖通过糖苷键连接1．2双缩脲法而成的化合物，是生命活动所需的重要物质之一．配制多糖水溶液，加2mL10%NaOH，摇匀，目前已经报道的天然多糖化合物约有300多种，再滴加数滴1%CuSO4溶液，反应结果显阴性，证按其来源可分为三类:植物多糖、动物多糖和微生明不含蛋白质和多肽．物多糖．目前，对植物多糖的研究多集中在药理作用等方面，由于植物多

3、糖具有抗肿瘤、抗衰老、降2纯度鉴定血糖、免疫调节等多种生物活性，并且毒副作用小和不易造成残留等优点［1-2］，植物多糖的研究逐渐纯化后的多糖在测定其结构和组成前必须经增多．但是，对于植物多糖进一步的分离纯化、组过纯度鉴定，而且多糖的纯度不能用通常化合物成、分子量等测定过程中还有一些疑问，这有待于的纯度标准来衡量．常见多糖纯度鉴定的方法有更多的人士进行深入研究．凝胶过滤法、HPLC法、醋酸纤维薄膜电泳法和琼脂糖电泳法、高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)比旋1杂质的检测法、超离心法、高压电泳法等，后三种方法由于误差比较

4、大已几乎不用．初提粗多糖含有少量果胶、色素、蛋白质、多近年来国内则主要采用HPGPC，使用凝胶装肽等杂质，其不仅导致过滤非常困难，而且妨碍后柱，经NaCl平衡、纯化、分离、NaCl溶液洗脱，再期脱色、浓缩工序的有效进行，严重影响多糖质用苯酚-硫酸、蒽酮-硫酸进行跟踪检测，该方法准量．对于检测多糖性质方面造成干扰，引起树脂中确度高，可在较短时间内将多糖进行分离，经凝胶毒．因而杂质的检测至关重要．目前采用两种比较色谱得到一对称峰，则证明该多糖是均一组分．通［3］简单的方法:紫外扫描和双缩脲法．过面积归一化法计算不同相

5、对分子质量多糖的组［4］1．1紫外扫描成．用UV分光光度计在200～400nm处进行扫常用的凝胶柱型号有Sephadex．G-50/100/描，如果在260、280、320nm处均无明显吸收，表150/200，SephacrylS-300HＲ等．在表1详细介绍明多糖中不含有蛋白质、色素．了3种植物多糖的纯度检测条件．收稿日期:2013-12-20基金项目:吉林省科技发展计划项目(20110710)作者简介:张忠华(1989-)，女，黑龙江大庆人，吉林化工学院与吉林大学联合培养的硕士研究生，主要从事菊芋多糖及菊芋低

6、聚糖质量分析方面的研究．*通信作者:高维平，E-mail:gwp1960@163．com34吉林化工学院学报2014年表1植物多糖的纯度检测方法比较序号样品测定方法色谱条件检测单位ShodexohPaksB－004HＲ凝胶色谱柱，三蒸1款冬花多糖HPLC西北大学水为流动相，流速:0．8ml/min柱温:25℃［5］染色液:甲苯胺蓝指示液:溴酚蓝2自养小球藻多糖琼脂糖电泳法厦门大学电泳条件:电压:10V/cm时间:90min缓冲剂:0．025mol/L硼砂溶液3五味子多糖醋酸纤维薄膜电泳法电压:250Kv时间:30

7、～40min沈阳农业大学染色液:甲苯胺懒蓝分析温度:301．1K硫酸法，DNS法，这三种方法只是粗略的测量，前3含量与组成的测定两种方法只能测出总糖的含量，不能测出还原糖的含量，而DNS法可以测出还原糖的含量，多糖3．1含量的测定含量为总糖含量去掉还原糖含量．该方法简单易多糖含量测定方法有苯酚-硫酸法，蒽酮-硫操作，但是精密度不够．酸法，3，5-二硝基水杨酸比色法(DNS)，高效液相目前，国内用的较多、相对成熟精准的方法是色谱法(HPLC)，气相色谱法(GC)，高效阴离子HPLC、GC和HPAEC-PAD．国外主

8、要应用交换色谱法-脉冲安培检测(HPAEC-PAD)，凝胶HPAEC-PAD，因为HPLC和GC方法在前期样品过滤色谱(GPC)，薄层色谱法(TLC)，毛细管电泳处理方面，需要酸水解和衍生化，会引起杂质产法(CE)等．生，而HPAEC-PAD法测避免了此弊端，可以更精测定总糖含量的方法有苯酚-硫酸法，蒽酮-确的测定各个单糖的含量，见表2．表2多种植物多糖的含量测定方法比较