甜瓜细菌性果斑病生防菌的筛选及其抑菌机理的初步研究

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1、分类号S476+.7学校代码10129UDC632学号2010202048甜瓜细菌性果斑病生防菌的筛选及其抑菌机理的初步研究ScreeningofBiocontrolAgentAgainsttoAcidovoraxcitrulliandItsAntibacterialMechanism申请人：吴丽媛学科门类：农学学科专业：植物病理学研究方向：植物病害综合防治指导教师：胡俊教授论文提交日期：二〇一三年六月摘要厚皮甜瓜是内蒙古巴彦淖尔市重要的经济作物，品质优良，市场销路好，当地农民种植的积极性很高，是致富的主要途径。细菌性果斑病是当地甜瓜生产中

2、的重要病害。果斑病是由西瓜嗜酸菌（Acidovoraxcitrulli）引起的一种毁灭性的种传病害，其发生逐年加重，目前主要以化学防治为主。本研究对该病的生物防治进行了探索。从采自内蒙古各地区的作物根围土样中分离筛选出对果斑病菌有抑制作用的拮抗细菌，并对抑菌效果好的菌株进行了生防效果测定、分类鉴定，还对其室外叶面定殖能力及发酵条件、抗菌机理进行了初步研究。结果如下：1.采自内蒙古各地区97个根围土样中，经过分离纯化，共得到127株细菌对西瓜嗜酸菌有抑菌效果，经过五次继代培养，还有19株细菌抑菌作用稳定。其中8株细菌的抑菌效果较好，菌株BW-

3、6的拮抗能力最强，抑菌带宽度为8mm。2.通过离体叶片和盆栽试验进行生测，菌株BW-6、BYP-28、NG-29的防治效果较佳，防效分别为80.3%、66.7%、72.9%，其中菌株BW-6不仅防治效果最好，且效果稳定。3菌株均可在甜瓜叶面上大量定殖，但随着时间的推移菌体数量逐渐减少。3.经形态学观察和生理生化测定，结合16SrDNA基因序列的分析，菌株BW-6鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）；BYP-28鉴定为侧孢短芽孢杆菌（Brevibacilluslaterosporus）；而菌株NG-29初步鉴定为短芽孢杆菌属

4、（Brevibacillussp）。4.各菌株的最佳发酵条件为：BW-6培养温度为28℃，初始pH8.0，初始接种量2%，装液量为30ml/250ml，碳、氮源为麦芽糖和牛肉膏；BYP-28培养温度为28℃，初始pH7.0，初始接种量2%，装液量为30ml/250ml，碳、氮源为麦芽糖和硝酸铵；NG-29培养温度为28℃，初始pH7.0，初始接种量2%，装液量为30ml/250ml，碳、氮源为麦芽糖和牛肉膏。5.对抗菌活性物质初步研究表明，菌株BYP-28和NG-29所产生的抑菌物质性质不稳定，滤液不具抗菌效果；菌株BW-6产生的抗细菌物质

5、能够耐-20℃低温，50℃以下具有活性、在pH4.0～9.0范围内活性不会变化、紫外线（30W）照射120min内不受影响。关键词：甜瓜；细菌性果斑病；生物防治；芽孢杆菌ScreeningofBiocontrolAgentAgainstAcidovoraxcitrulliandItsAntibacterialMechanismAbstractThickskinmelonisanimportantcashcrop.FarmersofbayinnaoercityinInnerMongoliawouldlovetoplantitwhichhelp

6、sfarmersgetrichforitsgoodqualityandpromisingmarket.MelonBacterialFruitBlotch(BFB)wasanimportantdiseaseinlocalmelonproduction.Acidophilicbacteria(Acidovoraxcitrulli)causesthisdevastatingdiseasewhichisincreasingyearbyyear.Thepreventionandcontrolmainlydependsonchemicalatprese

7、nt.Theobjectiveofthisstudyistoexplorebiologicalagentsagainstthisdisease.BacteriawithantagonisticactivityagainstAcidovoraxcitrulliwereisolatedfromcroprhizospheresoilsamplescollectedacrossInnerMongolia.Bacteriawithhighlyantagonisticactivitywereidentifiedandtestedforcontrolef

8、fect、outdoorcolonizationability.Atthesametimethepreliminarystudyonfermentationconditionsa