禽波氏杆菌免疫pcr检测方法的建立及其亚单位疫苗的研制

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1、IIIIlllWIMl$IIfY2303939ShandongAgriculturalUniversityPh．D．DISSERTATIONEstablishmentofImmuno．PCRMethodsforDetectingBordetellaAviumandStudyonItsSubuitVaccineDepartment：DepartmentofAnimalScienceandVeterinarymedicineMajor：PreventiveveterinarymedicinePh．D．Candidate：Gu

2、anhuaLiuSupervisor：RuiliangZhu基金资助国家自然科学基金项目(31272595、30972183)山东省科技发展专项计划(2012GNCll020)关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人

3、授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文，同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并向社会公众提供信息服务。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名导师签名日期符号说明及缩略词英文缩写英文全称中文名称B．口vi“mBordetellaavi“m禽波氏杆菌CFUConADMEMddH．20dNTPELISAIFAIL一2LB0DOMPPBSPCRSPFdghm111mlmmollpmSW烬LlLCo

4、lonyformingunitConcanavalinAdulbecco’Smodifiedeagle’SmediumdeionizeddistilledwaterdeoxyribonucleosidetriphosphateEnzymelinkedimmunosorbentassayIndirectfluorescenceantibodyassayInterleukin．2Luria—bertanimediumOpticaldensityOutermembraneproteinsPhosphate—bufferedsa

5、linePolymerasechainreactionSpecificpathogenfreedaygramhourminutemillilitermiilimoleratationperminutesecondweekmicrogrammicro】iter菌落形成单位伴刀豆素球蛋白达尔伯克改良伊格尔培养液重蒸水脱氧核糖核苷三磷酸酶联免疫吸附试验间接免疫荧光试验白细胞介素2LB．培养基光密度外膜蛋白磷酸盐缓冲液聚合酶链式反应无特定病原天克小时分钟毫升毫摩尔每分钟转数秒周微克微升中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯AllSTR

6、ACT．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．，．．．．．．．1．引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1．1禽波氏杆菌的研宄现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯。目录1．1．1禽波氏杆菌形态及培养特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一11．1．2禽波氏杆菌的生化特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．1．3禽波氏杆菌的抵抗力⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．1．4禽波氏杆菌的致病因子⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一21．1．5禽波氏杆菌病的流

7、行病学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31．1．6禽波氏杆菌病的临床症状和病理变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一51．1．7禽波氏杆菌病的诊断方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61．1．8禽波氏杆菌病的防治⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．91．2免疫PCR的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．2。1免疫PCR的基本原理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一101．2．2免疫PCR的类型⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．101．2．3免疫PCR系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．121．2．4免疫PCR的应用前景⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．141．3本研宄的目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．材料与方法⋯