生物絮团中细菌的分离鉴定及其特性研究

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1、硕士学位论文MASTERDISSERTATION论文题目：生物絮团中细菌的分离鉴定及其特性研究Isolationandidentificationofbacteriafrom英文题目：bio-flocandtheircharacteristicsanalysis作者：胡修贵指导教师：马甡教授黄倢研究员学位类别：学术学位专业名称：水产养殖研究方向：养殖生态学2013年5月30日谨以此论文献给关心帮助我的老师、同学和亲人。------------------胡修贵生物絮团中细菌的分离鉴定及其特性研究学位论文答辩日期：2013年5月30日指导教师签字：答辩委员会成员签字：独创声明本人声

2、明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日---------------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并

3、同意以下事项：1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊（光盘版）电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日生物絮团中细菌的分离鉴定及其特性研究摘要本实验从生物絮团中分离细菌，对其特性进行了研究；验证了细菌对凡纳滨

4、对虾的安全性；并利用筛选出的细菌培养生物絮团。主要研究结果如下：1生物絮团中异养亚硝化菌的分离鉴定及其特性研究采用富集培养、分离纯化等微生物学手段，从对虾养殖池的生物絮团中筛选出两株对氨氮具有高转化率的菌株。16SrDNA测序及系统发育分析结果表明两株菌均属于盐单胞菌属，菌株2011072708与食物盐单胞菌（Halomonasalimentaria）有99%的同源性，而菌株2011072709与胜利盐单胞菌（H.shengliensis）有100%的同源性。比较研究了两株菌在不同温度、盐度、pH、碳氮比条件下对氨氮的转化率，菌株2011072708在温度37°C、盐度30−40

5、、pH8、碳氮比28的条件下对氨氮的转化率最高；菌株2011072709在温度27°C−42°C、盐度40−50、pH6、碳氮比21的条件下对氨氮的转化率最高。研究结果表明胜利盐单胞菌（2011072709）对温度、盐度、pH、碳氮比等各方面的适应性优于食物盐单胞菌（2011072708），更合适在生物絮团技术中得到应用。2生物絮团中一株硝化细菌的筛选鉴定及其特性的研究从对虾生物絮团养殖池中分离出一株对亚硝酸盐具有高效转化能力的优良菌株，根据16SrDNA序列分析结果，初步确定为盐单胞菌属，与Halomonasvenusta在16SrDNA水平上有99%的高相似性。研究了碳氮比、

6、初始pH、盐度、温度四个因素对菌株2011072701转化亚硝酸盐的影响，确定了最适条件。结果表明，该菌株在碳氮比15、初始pH8-10、盐度30-40、温度37℃对亚硝酸盐转化效率最高，其最高转化率为91.69%。本研究从对虾生物絮团养殖池中筛选出一株亚硝酸盐转化菌，在进一步丰富亚硝酸盐利用菌种质资源的同时为该菌株在生物絮团养殖技术的实际应用提供理论基础。3生物絮团中3株有益菌的筛选鉴定及初步研究采用拮抗试验的方法从对虾养殖池的生物絮团中筛选出三株对对虾病原菌（鳗弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌）有拮抗作用的细菌，经16SrDNA测序及系统发育分析结果表明菌株2011072701与

7、盐单胞菌（Halomonassp.）有99%的同源性，菌株2011072709与胜利盐单胞菌（H.shengliensis）有100%的同源性，菌株2012052503与巨大芽孢杆菌有（Bacillusmegaterium）有99%的同源性。溶血试验证实这三株菌不产生溶血素，不具有潜在的致病性；药敏试验表明菌株2011072701和2011072709对其中10中抗生素表现为耐药，而菌株2012052503只对青霉素耐药，对其余19种抗生素表现为敏感；动物安全7性实验表明菌株浓度