2型糖尿病大鼠调节性t细胞及炎症因子的动态研究

《2型糖尿病大鼠调节性t细胞及炎症因子的动态研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名瓣J导师签章：罗旋幽礼二级学院领导签章17矽萨j月W日研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别

2、加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导老师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名鸯觯)导师签章：孑l矗：』；啦／如眩年步月W日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8研究论文2型糖尿病大鼠调节性T细胞及炎症因子的动态研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯99日!J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1O结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30综述免疫细胞及其相关的炎症因子在糖尿病及其并发症中的作

4、用⋯34致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47中文摘要2型糖尿病大鼠调节性T细胞及炎症因子的动态研究摘要目的：糖尿病发病率逐年上升，日益成为影响人类健康的重要因素，其并发症也严重危害着人们的身体健康。目前认为2型糖尿病(T2DM)及其并发症是免疫细胞功能改变导致的慢性炎症性疾病，但其机制尚未完全阐明。T细胞是一种重要的免疫细胞，在多种炎症性疾病和自身免疫病的致病机制中具有重要意义，其中，Thl、Th2、CD4+CD

5、25+调节性T细胞(Treg)和Thl7细胞亚群是参与这些疾病的主要T细胞。新近研究表明，2型糖尿病鼠模型及糖尿病患者中，这些细胞亚群的分化以及产生的相关炎症因子参与了糖尿病的慢性炎症。T2DM患者血液中Th．17的数量明显高于健康对照者，且经体外刺激m．17的产生也明显增高，同时IFN-?的产生也增高，而CD4+CD25+T调节性T细胞百分含量减少，m-4的产生没有变化。小鼠T2DM模型中也是同样的结果，且Th2和Tregs可以逆转Thl介导的的病理反应。另外T2DM患者血清中IL．6、TGF．131

6、、IL．113和TNF．0【水平也升高。这些资料都表明糖尿病发病过程中前炎症因子的释放以及炎症细胞的分化均促进了糖尿病慢性炎症的发生，但在糖尿病进展过程中这些细胞亚群的分化和相关细胞因子的变化，以及与并发症的发生的相关研究还未见系统报道。基于此，本研究建立了2型糖尿病大鼠模型，在糖尿病进展的不同时间段，获取脾细胞，观察T细胞亚群及其相关细胞因子的动态变化，进一步探讨糖尿病及其并发症的免疫学机制，为糖尿病及其并发症的治疗与预防提供实验依据。方法：1动物模型的建立及常规指标的检测：SD大鼠随机分为正常对照组

7、和糖尿病组(DM组)，DM组高糖高脂喂养40天后，腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40mg／kg(STZ溶于0．1mol／L枸橼酸盐缓冲液中，pH值4．4)，对照组只注射等剂量枸橼酸盐缓冲液，72h和1周后尾静脉随机用血糖仪测大鼠的血糖，血糖两次浓度>16．7mmol／L，确定为DM模型。分别于糖尿病大鼠模型建成后2、4、8、12周，每组取5只大鼠称重，分别用代谢中文摘要笼收集24h尿，用于测定24d'时尿量；心脏取血，分离血清，用于测定血糖(Glu)、尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)。2流式细胞技术检测

8、DM组和对照组脾脏中调节T细胞的数量变化：DM组和对照组在对应时间段取脾脏，制备成脾单个核细胞悬液，用流式细胞仪检钡,JJCD4+CD25+调节T细胞的百分含量。3不同时间段取DM组和对照组脾细胞，进行淋巴细胞分离，获取单个核细胞后，用ConA束U激于12、24,J、时收集上清，ELISA法检测上清中IL一4、IFN吖的表达水平。4不同时间段取DM组和对照组脾组织，用RT．PCR法检测脾组织中IL．4、IFN．7的mRNA的表达水平。结果：