丹参素和半胱氨酸衍生物缀合物对huvecs和sh-sy5ys抗氧化和抗凋亡作用机制初步的研究

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1、万方数据复凰硕士学位论文丹参索衍生物抗凋亡作用研究IlMIIIIIIILIIIIIllllllIII11111lY2705571目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l中文摘要⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯1Abstract．．⋯．．．．．．．．．．．⋯．⋯．．．．．．．⋯．⋯．．．．。．。．．．．．．⋯⋯．．．．3前言⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5第一部分化合物1，2和3对SH-SY5Ys的抗凋亡作用的评估⋯⋯⋯⋯⋯．．6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6一、材料⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．6二、方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．7结果⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ll讨{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．18第二部分化合物3对HUVEC细胞抗凋亡作用的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．20一、材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20二、方法．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．．．⋯．．⋯．．23结果⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．．⋯⋯⋯⋯。．．33总结．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．35展望⋯．⋯⋯⋯．．⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯。．36参考文献⋯⋯⋯．⋯．．⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37综j鲞．⋯．．⋯．⋯⋯⋯⋯．．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．40后记．⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45在读期间已发表和拟发表的论文和专利⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．46万方数据复旦大学硕士论文缩略词表丹参素衍生物抗凋亡机制研究FBSFetalbovineserum胎牛衄清BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白HUV

4、ECsHumanumbilicalveinendothelialcells人脐静脉内皮细胞SH．SY5YHumanneuroblastomacell人神经母细胞瘤DMEM【／17．12Dulbecco’SmodifiedEagle’S含F—12的改良的Eagle培养基medium／F．12NACN·-acetyl·-L-·cysteineN一乙酰基．L．半胱氨酸LDHlactatedehydrogenaseenzyme乳酸脱氢酶MTT3-(4，5-dimethylthiaz01)2，5-diphenyl甲基噻唑基四唑tetrazoli

5、umbromideSODsuperoxidedismutase超氧化物歧化酶GSHglutathione谷胱甘肽MDAMalondialdehyde丙二醛PVDFpolyvinylidenedifluoride偏聚氟乙烯TBSTfis．bufferedsaline三羟甲基氨基甲烷缓冲盐水DMS0dimethylsulfoxide二甲基亚砜GPxGlutathionePeroxidase谷胱甘肽过氧化物酶CPARPCleaved-Poly(ADP-ribose)Polymerase断裂的二磷酸腺苷多聚酶万方数据复旦火学硕士论文中文摘要丹

6、参素衍生物抗凋亡作用研究【目的】丹参素作为中药丹参中的有效成分，有着广泛的生物活性，如扩张冠状动脉、抑制血小板聚集、抗心肌细胞凋亡和抗炎作用等，而这些作用至少部分与其抗氧化和抗凋亡作用有关。但是由于丹参素的羟基的化学不稳定性，所以很难从天然产物中分离和纯化丹参素，而且丹参素因为脂溶性差，所以很难进入细胞膜，因此我们在已有的研究基础上，我们将丹参素与半胱氨酸衍生物分子结合，以加强其稳定性和脂溶性。基于以上，我们设计并合成了化合物l，2，3，并测定其对H202刺激的SH．SY5Ys和HUVECs的保护作用。COoMeHN入vs8nCOOM

7、eHN人√SBn【方法】因化合物l，2为手性异构体，而化合物3为消旋体，所以我们先分析化合物l，2，3的药效和结构差异的关系。首先，我们将SH．SY5Y细胞分为6组，分别为：阳性药组(NAC，5mM)；化合物l、2、3组(50州)；Model组以及Control组。将细胞种好后，部分细胞用500M的化合物l，2，3和5mM的NAC预给药4小时，然后将除了Control组之外的细胞用2009M的H202刺激12小时。待实验结束后，用MTT和LDH法来测定药物对细胞的保护作用，用光镜法和Hoechst染色法来测定药物对细胞的凋亡的抑制作用

8、，最后再用MDA法、SOD法、GSH法和Gpx免疫荧光染色法来测定药物抗氧化作用。而后，我们又用HUVEC细胞对化合物3进一步进行机制的研究，将HUVEC细胞分为6组，阳性药组(NAC，5mM)，59M、509M和100