桑蚕丝低温成形组织工程支架预研和plga支架动物实验的研究

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1、杭州电子科技大学硕士学位论文桑蚕丝低温成形组织工程支架预研与PLGA支架的动物实验研究研究生:安晓指导教师:史廷春教授2012年12月DissertationSubmittedtoHangzhouDianziUniversityfortheDegreeofMasterPre-researchofLDMmulberrysilktissueengineeringscaffoldsandanimalexperimentresearchofPLGAscaffoldsCandidate:AnXiaoSupervisor:ShiTing

2、chunDecember,2012杭州电子科技大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:日期:年月日学位论文使用授权说明本人完全了解杭州电子科技大学关于保留和使用学位论文的规定,即:研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单

3、位属杭州电子科技大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为杭州电子科技大学。学校有权保留送交论文的复印件,允许查阅和借阅论文;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。(保密论文在解密后遵守此规定)论文作者签名:日期:年月日指导教师签名:日期:年月日杭州电子科技大学硕士学位论文摘要随着社会的发展、人们生活水平的提高,人类对损伤、疾病的治疗要求也越来越高,传统的修复方法有自体组织移植术和同种异体器官移植法,虽然能够取得一定的疗效,但会导致很多并发症及附加损伤。由此

4、可见,应用传统的治疗方法已经难以满足需求,必须寻找新的治疗途径。"组织工程学"这一概念,是RobertLanger和JosephPVacanti在80年代的时候首次提出的,为千千万万需要器官移植以及组织修复的患者带来了曙光。组织工程学是预先在体外构建一个有生物活性的种植体,培养一段时间后,移植入体内,从而修复缺损的组织,最后替代组织、器官的一部分或全部功能,或者不移植入体内,在体外作为替代组织、器官部分功能的装置,以延长生命活动,提高生活的质量。组织工程学的研究内容主要有三个方面:种子细胞、生物支架材料及生长因子。其中,支架

5、是细胞生长的场所,细胞在其上生长、增殖、分化,并最终长成一个器官或组织,因此,生物支架材料的研究是组织工程学研究的一个非常重要的方面。本文包括两部分内容,即桑蚕丝低温成形组织工程支架的研究和修复脊髓损伤的动物实验,其中,第一章、第二章、第三章、第四章阐述了桑蚕丝低温成形组织工程支架的研究的有关内容,第五章阐述了修复脊髓损伤的动物实验的有关内容。桑蚕丝是由桑蚕体内的绢丝腺合成、分泌的纤维蛋白,是一种天然的高分子生物材料,具有良好的生物相容性和力学性能,以及较慢的降解速度,在医疗领域已经获得了广泛的应用。然而,低温沉积制造工艺是

6、一种将材料的挤压/喷射过程和热致相分离过程集成起来的一种快速成型技术,主要是在低温室中形成所需模形,然后再利用热致相分离法将材料和溶剂相分离。此方法成形的支架具有较高的孔隙率;具有精确的三维结构;可以很好的保持材料的生物性能。综上,本文考虑采用低温沉积制造工艺将桑蚕丝成形为三维的支架,并进行了相关内容的研究,希望将二者的优势结合,扩大桑蚕丝的应用领域。组织工程的迅速兴起给脊髓损伤后的神经功能恢复带来了新的希望,而支架的三维结构成为用组织工程方法治疗脊髓损伤的关键因素。本文采用PLGA作为生物支架材料,通过低温快速成形工艺制备

7、了脊髓支架,对支架的各项性能进行表征后,结果表明支架的孔隙率、亲水性、降解性等满足组织工程脊髓支架的要求。然后采用雪旺细胞进行了支架的体外细胞培养实验,观察显示,雪旺细胞I杭州电子科技大学硕士学位论文在PLGA支架上生长、增殖情况良好,实验表明支架的细胞相容性良好,适合雪旺细胞粘附和生长。最后采用大鼠进行了支架修复脊髓损伤的动物实验,即先将大鼠的脊髓损伤,然后将粘附有雪旺细胞的PLGA支架移植到大鼠的脊髓损伤部位,正常饲养一个月,观察大鼠的恢复情况,每周进行一次BBB评分。实验结果表明,在实验后的第1周,脊髓损伤后的大鼠均有

8、不同程度的截瘫,但是从第2周开始,大鼠的BBB评分开始慢慢的恢复。关键词:组织工程,桑蚕丝,低温沉积制造,支架,脊髓损伤II杭州电子科技大学硕士学位论文ABSTRACTWiththedevelopmentofsocietyandtheimprovementofpeople'slivings

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