牛源金黄色葡萄球菌的耐药性分析及PFGE分型

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1、分类号密级UDC单位代码10435硕士学位论文牛源金黄色葡萄球菌的耐药性分析及PFGE分型AnalysisoftheAntibioticResistanceandPFGETypingofStaphylococcusaureusfromBovine研究生姓名孙彬指导教师邹明教授刘宝涛讲师学科专业基础兽医学研究方向兽医药理学中国∙青岛二0一八年六月AnalysisoftheAntibioticResistanceandPFGETypingofStaphylococcusaureusfromBovineThesissubmit

2、tedtoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomySunBin（DepartmentofAgronomy）Supervisor:ZouMingLiuBaotaoQingdao.ChinaJune,2018独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获

3、得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日青岛农业大学

4、硕士学位论文摘要牛源金黄色葡萄球菌的耐药性分析及PFGE分型摘要目的：通过对青岛地区牛源金黄色葡萄球菌进行分离鉴定，了解其分布状况，为金黄色葡萄球菌的风险评估提供基础数据；对金黄色葡萄球菌的耐药性进行表型和基因型检测，科学合理的指导临床用药，为有效降低耐药性的产生速度和延长药物使用年限提供依据；通过PFGE技术对金黄色葡萄球菌进行分型，了解金黄色葡萄球菌在不同地区和不同来源间的传播机制，为控制疾病的发生提供理论依据。方法：2016-2017年采集青岛地区27个奶牛场样品，其中奶样1057份，鼻拭子样品772份，土壤样品1

5、03份，奶牛场污水84份，牛舍饮水59份。利用微生物学和PCR方法对所采样品进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定；按照CLSI标准的琼脂稀释法对金黄色葡萄球菌进行耐药表型分析；采用PCR方法对β-内酰胺类、氨基糖苷类及大环内酯类等耐药基因进行检测；运用PFGE技术对金黄色葡萄球菌进行分型研究。结果：样品分离结果，从2075份样品中共分离出103株金黄色葡萄球菌，分离率为5.0%，其中在奶样中的分离率为7.2%（76/1057），在鼻拭子中的分离率为2.5%（19/772），饮水中的分离率为3.4%（2/59），在污水中的分离率为

6、3.6%（3/84），土壤中的分离率为2.9%（3/103）。药敏试验结果表明，103株金黄色葡萄球菌对氨苄西林的耐药率最高，达87.4%，对甲氧苄啶、苯唑西林和青霉素的耐药率次之，分别为79.6%、77.7%和74.5%，对红霉素、四环素、利福平、克林霉素、利奈唑胺、头孢西丁、泰妙菌素、环丙沙星、左氧氟沙星及恩诺沙星的耐药率介于12.6%-36.9%之间，对头孢噻呋及氯霉素的耐药率较低，分别为4.9%和2.9%，对万古霉素耐药率为5.8%，对庆大霉素的耐药率最低，为1.9%。所有分离株最多对9类药物耐药，其中对3类和4

7、类药物耐药菌株最多，各占11.7%。耐药基因检测结果，β-内酰胺类基因blaZ检出率最高，为63.1%，mecA基因检出率为23.3%，根据标准确定为MRSA，所有MRSA只携带β-内酰胺类耐药基因；大环内酯类耐药基因ermB、ermC和四环素类耐药基因tet（L）、tet（K）的检出率分别为6.8%、4.9%和12.6%、1.9%；氟苯尼考耐药基因fexA检出率为2.9%；β-内酰胺类耐药基因blaVIM、氨基糖苷类耐药基因ant(4’)-Ia和恶唑烷酮类耐药基因optrA检出率较低，均为0.97%。103株金黄色葡萄

8、球菌均未检测到喹诺酮类耐药基因和万古霉素耐药基因。PFGE结果，103株金黄色葡萄球菌共有53种电泳模式图，归为46种型，主要型为5、8、9、14和33，这5种型的电泳图完全一致，占所有菌株的37.9%，其中8和33最多，各I青岛农业大学硕士学位论文摘要有10株，占9.7%，并且8型中有8株菌来自场3，33型中10株