视网膜神经节细胞放射损伤后mirnas的差异表达及靶基因预测

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1、视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的差异表达及靶基因预测⑧论文作者签名：叠釜堡蚕指导教师签名：醴论文评阅人1：戚晓红＼副主任医师＼浙江省人民医院评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：尹金福＼主任医师＼浙江大学附属第二医院晋秀明＼副主任医师＼浙江大学附属第二医院答辩委员会席：姜节凯＼主任医师＼浙江大学附属第二医院委员1：孙朝晖＼主任医师＼浙江大学附属第二医院委员2：叶娟＼主任医师＼浙江大学附属第二医院委员3：陈佩卿!圭堡堕塑!逝婆盔堂堕星箜三堕堕委员4：苴丞蕴!圭堡堕塑!塑望堕堕委员5：答辩日期：2013年5月29日浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师

2、指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论一躲杜踊蝌期：M年f月矽日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权迸姿盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)⋯

3、一虢蕾乏确⋯名：彩签字日期：pl孓年r月巧日签字日期咄萨"矽日浙江大学硕上学位论文致谢致谢本研究及学位论文是在敬爱的王凯军老师的耐心指导下完成的。我衷心的感谢王凯军老师在我三年硕士期间的学习、生活、工作等各方面给予的耐心指导。您渊博的学识，严谨的治学精神，精益求精的工作态度和平易近人的品格，都使我受益匪浅。在研究生期间，您不仅教授了我许多医学科研知识，更让我学习到了如何和患者沟通，如何待人接物，如何成为具有高尚医德的医疗工作者。这些都会让我一生谨记，且终生受用。衷心感谢浙二眼科中心的姚克主任、晋秀明老师、尹金福老师、叶娟老师、杨亚波老师、徐雯老师、申屠形超老师、孙朝晖老师等对我的谆谆教导

4、，是你们帮助我提高了临床操作技能，锻炼了我的临床思维能力，使我在研究生阶段有了很大的成长。感谢滕文琪等师兄们，许玲俐、朱亚楠、李谨予、丁文婷、王琦玮等师姐们，赵素娟、杨弈、宋峰伟、翟怡等同学和苗琦、尹厚发、鱼音慧、刘健、何峰英、赵莹莹等师弟师妹们，在我的课题实施及论文撰写中所给予的帮助、支持和鼓励。感谢我的父母和朋友们，你们无微不至的关心和一路的鼓励和支持，才让我勇敢地走到现在，我要将最崇高的敬意献给你们!衷心感谢参与我论文评审及答辩的各位老师，谢谢你们给我一个审视三年来学习成果的机会，促使我进一步努力提高自己的科研水平和临床技能水平。浙江大学硕士学位论文中文摘要视网膜神经节细胞放射性损

5、伤后miRNAs的差异表达及靶基因预测浙江大学医学院附属第二医院眼科中心硕士研究生朱美娟导师王凯军中文摘要【目的】研究不同剂量的X放射线对视网膜神经节细胞(RGCs)生存率的影响；初步筛查x放射线照射后的RGCs中差异表达的miRNAs，并预测其靶基因。l方法】用0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy的X放射线照射生长24h的RGCs，每日在倒置相差显微镜下观察各组细胞的密度和形态变化。MTT法检测照射后第5天各组RGCs的存活率。应用miRNA芯片检测6Gy和0GyX放射线照射后第3天的RGCs中差异表达的miRNAs。qRT-PCR验证芯片结果的准确性。应用Targetscan和mi

6、croRNAorg两种靶基因预测软件预测表达差异较明显的5种miRNAs的靶基因。【结果】X线照射后前4天各组的细胞密度和细胞形态均无明显差别，但第5天，4Gy、6Gy和8Gy照射组的细胞密度降低，细胞形态也发生了变化。MTT示4Gy、6Gy和8Gy照射组的细胞存活率比0Gy对照组明显降低(p<0．01)。miRNA芯片结果显示6Gy照射组中差异表达的miRNAs有37个，其中上调的有16种，下调的有31种。其中6种miRNAs(miR．192、．34a*、．877、．34c、．34a、．22)上调1．5倍以上，6种miRNAs(miR一212、．338、．219—5p、．503、．21

7、0、miR-505*)下调至0．667倍以下。qRT-PCR证明芯片的结果可靠。靶基因软件预测的5种miRNAs的靶基因参与细胞生长、发育、分化、凋亡和抗凋亡等过程。II浙江大学硕士学位论文中文摘要【结论】4Gy、6Gy、8Gy的X放射线能造成RGCs损伤；总剂量6GY的X放射线能够引起RGCs中一些miRNAs的表达变化；差异表达的miRNAs可能通过调控其靶基因参与在RGCs的放射损伤过程中。关键词：视网膜神经节细胞；X放射线；