虎杖化学成分及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

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1、分类号：R931.71单位代码：10193密级：公开学号：2012112硕士学位论文虎杖化学成分及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究Researchonchemicalcomponentsandα-glucosidaseinhibitingactivityofHuzhang作者姓名：__________曹扬__________学位类别：医学_____________专业名称：生药学_____________研究方向：植物药_____________指导教师：__________田义新教授________________焦连庆研究员____所在学院：__________中药材学院_

2、_________2015年3月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所

3、完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要虎杖为蓼科植物虎杖Polygonumc

4、uspidatumSieb.etZucc.的干燥根及根茎，用于祛风除湿、清热解毒、降血降脂等。虎杖中主要含有蒽醌、二苯乙烯、黄酮等成分。其中二苯乙烯类成分和蒽醌类成分含量较大，且药理活性广泛。可治疗糖尿病，肝病等疾病，白藜芦醇还有抗氧化、抗癌、抑菌等作用，具有很高的研究价值。因此，选择虎杖作为研究对象，研究虎杖中抑制α-葡萄糖苷酶活性成分的最佳提取工艺，分离单体化合物，建立一测多评法（QAMS）对不同产地虎杖药材进行质量评价。探索虎杖中总蒽醌含量的测定方法，研究其体内降血糖活性，为虎杖的临床应用提供更多的实验依据。第一，采用正交实验法，通过多指标评分优选虎杖中抑制α-葡萄糖

5、苷酶活性成分的最佳提取工艺。以乙醇浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量为考察因素，以虎杖苷、大黄素、大黄素甲醚的含量及α-葡萄糖苷酶抑制活力为指标进行正交试验，确定虎杖中抑制α-糖苷酶活性成分的最佳提取工艺，为研究虎杖中抑制α-葡萄糖苷酶活性的药效物质奠定基础。最佳提取工艺为：8倍量70%乙醇提取2次，每次2h。说明虎杖苷、大黄素、大黄素甲醚三种化学成分对虎杖抑制α-葡萄糖苷酶效果有促进作用。第二，按照最佳提取工艺方法提取虎杖药材，采用不同极性溶剂提取及活性跟踪，获得有效部位。用70%乙醇提取虎杖，得到虎杖总提物，再用环己烷-乙酸乙酯（2:1）及乙酸乙酯进行提取，得到环己烷-

6、乙酸乙酯（2:1）、乙酸乙酯及乙酸乙酯不溶三个部分。对虎杖总提物、环己烷-乙酸乙酯（2:1）、乙酸乙酯和乙酸乙酯不溶这4个部分进行高效液相色谱和α-葡萄糖苷酶抑制活力测定，各部分均对α-葡萄糖苷酶有抑制作用，且虎杖总提物部分最佳。第三，经过反复硅胶色谱柱层析和C18填料柱层析，从虎杖总提物中分离纯化得到8个单体化合物，采用核磁共振氢谱及碳谱进行结果分析，同时通过与文献报道比较，鉴定结构为：大黄素、大黄素甲醚、大黄酸、大黄酚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、虎杖苷和白藜芦醇。第四，建立利用一个对照品同步测定虎杖药材中大黄素、大黄素甲醚、

7、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、虎杖苷、白藜芦醇6种成分的分析方法，并进行了方法学考察。这为虎杖药材中多种成分的含量测定提供简单，快捷，可靠的方法。以大黄素为内参物，建立大黄素与其他5种成分的相对校正因子及相对保留时间，以相对保留时间进行色谱峰定位，以相对校正因子计算其它5种成分的含量，并对不同产地虎杖药材中6种成分含量校正因子法的计算值与外标法实测值进行比较。结果表明，一测多评法计算结果与外标法（ESM）测定值接近，无显著性差异。说明一测多评法测定虎杖药材中含量结果简捷、可