talen介导的β-乳球蛋白基因敲除奶山羊的生产

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1、分类号：S854学校代码：10712UDC：602研究生学号：2011060331密级：公开2015届攻读博士学位研究生学位（毕业）论文TALEN介导的β-乳球蛋白基因敲除奶山羊的生产学科专业：临床兽医学研究方向：动物胚胎工程研究生崔趁趁指导教师：靳亚平教授完成时间：2015年5月中国陕西杨凌本研究由转基因新品种培育重大专项课题研究计划(2013ZX08008-004)提供资助ThisworkwassupportedbygrantsfromTheResearchPlanofGrandSpecilizedTopicsforCultivationofNewTransgeneticBiologica

2、lVarieties(2013ZX08008-004)Classificationcode;S854Universitycode:10712UDC:602Postgraduatenumber:201106031Confidentialitylevel:OpenDissertationforDoctorDegreeNorthwestA&VUniversityin2014TALEN-MEDIATEDGENETARGETINGOFTHE(3-LACTOGLOBULINGENEINGOATMajor:ClinicalveterinarymedicineResearchfield:Animalembry

3、oengineeringNameofPostgraduate:ChenchenCuiAdviser:Prof.YapingJinCo-adviser:Dateofsubmission:YanglingShaanxiChina研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的博士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人

4、和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间：Y/夂年<月3日导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的博士研究生所呈交的博士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。导师签名:时间年/月多曰关于研究生学位

5、（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产想归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，必须以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人(包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，

6、不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名:时间：xVT年Z月$曰导师签名时间：对年彡月；曰TALEN介导的β-乳球蛋白基因敲除奶山羊的生产摘要β-乳球蛋白（β-lactoglobulin，BLG）是羊乳中引起婴幼儿乳过敏症的主要过敏原之一。目前多采用生物化学方法对β-乳球蛋白进行加工处理以降低其致敏性，但并不能从根本上解决其致敏问题。靶向基因编辑技术和转基因动物技术的发展为从根本上彻底消除乳汁中的

7、β-乳球蛋白提供了可能。研究表明，TALEN介导的基因打靶可以在生物基因组特定位点进行精确的基因插入或删除。本研究通过构建以山羊BLG基因第一外显子为靶位点的TALENs表达载体及基因打靶载体，在山羊胎儿成纤维细胞中利用TALEN介导的基因打靶技术对BLG基因进行敲除，利用体细胞克隆技术生产BLG基因单敲除奶山羊；并通过在山羊体细胞中进行连续的基因打靶获得BLG基因双敲除奶山羊。研究内容如下：1.