je疫苗突变株生物学特性及鸭坦布苏病毒流行株基因特征研究

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1、分类号＾麵＿学￣Ｗ＂為奇、農養乂聲博±学位论文化疫苗突变株生物学特性及鸭坦布苏病毒流行株基因特征研究王经满指导教师陈縛言教授专业名称预防兽医学研究方向畜禽传染病答辩日期二〇－－五年九月ＴＨＥＳＴＵＤ把ＳＯＦＴＨＥＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳＯＦＪＡＰＡＮＥＳＥＥＮＣＥＰＨＡＬＩＴＩＳＶＡＣＣＩＮＥＭＵＴＡＮＴＡＮＤＴＨＥＧＥＮＯＭＥＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮｏｒＡＰＲＥＶＡＬＥＮＴＳＴＲＡＩＮＯＦＤＵＣＫ

2、ＴＥＭＢＵＳＵＶＩＲＵＳＢｙＪｉｎｇｍａｎＷａｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＰｕａｎＣｈｅｎｐｙＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄｔ：ｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｆｏｒｑ化ｅＰｈｉｌｏｓｏｐｈｙＤｅｇｒｅｅｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内

3、容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名／年月日＾＾［＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存

4、和汇编学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名：ｙ足碱品〇／又年月之扫＾导师（需亲笔）签名：７（５＾年月＾日＾目录目录摘耍ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＶ缩略语ＸＩ一第篇文献综述１一第章日本脑炎病毒及其与宿主相互作用概述１１日本脯炎的流行持征１２曰本脑炎的病原特征３２．１病毒粒子的性质３２．２ＪＥＶ的基因结构４２．３ＪＥＶ结构蛋白特征７２．４ＪＥＶ非结构蛋

5、白特征９２．５ＪＥＶ毒力基础１３３ＪＥＶ的传播特征１４４ＪＥＶ的致病机制１５５ＪＥＶ疫苗的研究进展１６５．１鼠脑组织的灭活疫苗１７５．２细胞培养的弱毒疫苗１７５．３细胞培养的灭活疫苗１８５．４基因工程嵌合弱毒活疫苗１８５．５其他疫苗１８６宿主针对ＪＥＶ免疫防御１９６．１先天性免疫防御１９６．２适应性免疫防御１９７日本脑炎病毒对宿主的免疫逃逸２０７．１ＪＥＶ抑制干扰素通路２０７．２ＪＥＶ抑制ＮＫ细胞的免疫监测和细胞毒

6、性作用２１７．３ＪＥＶ活化自隨进行免疫逃逸２１参考文献２３第二部分实验研究３９第二章日本脑炎病毒Ｅ２７９对其蚀斑形态和致病力的作用研究３９１Ｎｓｒ蛋白在曰本脑炎病毒感染及致病中的作用机制研究１材料和方法４１１．１材料４１１２实验方法４２．２实验Ｓ果４９２．１商品化疫苗中ＪＥＶ的基因含量测定４９２．２商品化疫苗中ＪＥＶ的病毒滴度测定５０２．３四株疫苗病毒的全基因扩增与测序５１２．４四株疫苗病毒的基因序列比较５２２．５四株疫苗突变位点

7、的峰图分析５４２．７四株疫苗株的氨基酸序列分析５５’二２．８四株疫苗株５非编码区ＲＮＡ级结构预测结果％５８２．９疫苗株蚀斑纯化后ＪＥＶ特性分析２．１０疫苗株蚀斑纯化后全基因分析５８２．１１ＪＥＶＥ２７９位显著增加子代病毒的产量。６１２．口ＪＥＶＥ２７９位显著增加病毒的神经毒力紀３６２参考文献６５第Ｈ章ＪＥＶＮＳｒ蛋白在疫苗弱毒株的产生机制及其在病毒感染中的作用研究７１１欄抓法７４１．１材料７４１．２实验方法７５２实验结果８６２

8、．１全基因的扩増和全长ｃＤＮＡ克隆的构建始２．２姪救病毒在体外的生物学特性８８２．３捶救病毒的全基因分析９１－２２．４搔救病毒在ＢＨＫ１细胞上的生长曲线特征％２．５病毒感染细胞后分泌ＮＳｒ蛋白的特征分析９４，ＥＶ２．６ＮＳ１蛋白对Ｊ神经毒力的影响９５２．７逐救病毒感染对现鼠免疫