乙型肝炎病毒核心抗体igg抑制乙型肝炎病毒复制的研究

乙型肝炎病毒核心抗体igg抑制乙型肝炎病毒复制的研究

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1、tf完,京i知如碌f中@聲3钟《獻博i研究生学位论文北京协和医学院研究生院学校代码1;0023:B20学号12022002博±学位论文乙型肝炎病毒核也抗体IG抑制乙型肝炎病毒复制的g研究所院;卫生部临床检验中也学科专业:临床检验诊断学姓名;勾宏娜指导教师:王露楠研究员导师小组;李金明研究员二〇—完成日期;五年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加W标注和致谢的地方外,不包含其他人己经发

2、表或撰写过的研究成果,也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢。'琶、学位论文作者签名:签字日期:女年r月/日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解北京协和医学院有关保存、使用学位论文的管理办法。有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权北京协和医学院可W将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(

3、保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名;3吝处巧导师签名;了签字日期■6:少年j月日签字日期;年:T月户日学位论文作者毕业后去向;工作单位:电话:通讯地址::邮编北京协和医学院博±学位论文目录英文缩略词13中淵要5英文摘要刖胃11口.材料和方法1丄实验材料和试剂配制121丄1-.仪器(表11)121丄2-.主要实验耗材(表12)131...13细胞系和质粒141.2.方法2212丄I22.乙型肝炎病

4、毒核也抗体gG纯化与鉴定12HBcA22..1丄纯化人源b的血清标本筛选12丄2G纯化27..己型肝炎病毒核也抗体Ig进行测定:1.2丄3.对纯化后乙型肝炎病毒核必抗体IgG的蛋白浓度巧.12.1.4.对纯化后HBcAb效价进行测定301.2.2.艺型肝炎病毒核也抗体IgG进入巧细胞能力验证30123I巧...己型肝炎病毒核也抗体gG对核也蛋白亚细胞分布的影响1.2.3.1.激光扫描共聚焦显微镜检测核也蛋白亚细胞分布W及免疫复合物形成....361.2.3.2.WesternBlot验证

5、HBcAbIgG对HBcAg亚细胞分布的影响371.2.4.乙型肝炎病毒核也抗体IgG对HepG2.2.巧细胞内HBV复制的影响巧1.2.4.1用核也抗体IgG处理HepG2.2巧3912GHBABe:40.2.4.艺型肝炎病毒粉。抗体Ig对sg和HAg分泌的影响….…1.2.4.3.HBcAbIgG对HBV病毒释放的影响41北京协和医学院博±学位论文1.2.4.4.HBcAb对细胞内HBVcccDNA和pgRNA的影响471.2.4.4.1.细胞内总RNA和DNA

6、的提取481.2.4.4.2实时定量巧光PCR检巧!]细胞内HBVcccDNA的变化491.2.4.4.3.实时定量巧光逆转录PCR检测细胞内HBVpgRNA的变化521.25统计学分54.析256.2.1.乙型肝炎病毒核也抗体IgG纯化与鉴定562丄1.纯化人源HBcAb的血清标本筛选5662丄2.艺型巧炎病毒核也抗体IgG纯化52丄3乙型肝炎病毒核也抗体IgG浓度测定562.1.4对纯化后HBcAb效价进行测定58:22HBcAIHeG22巧细胞能力验证巧.

7、.bgG进入p..23HBcAb对He22巧细胞内HBc的亚细胞分布的影响59..pG..23丄激HBcAbIHBcA亚细胞分布的影响巧.光扫描共聚焦显微镜验证gG巧g2tlt60.3.2.WesernBo验证HBcAbIgG对HBcAg亚细胞分布的影响2.4.1.HBcAbIgG对HepG2.2.15细胞内HBV复制的影响612.4丄1胃蛋白酶水解核也抗体分离结果612.4丄2HepG2.2.巧细胞培养上清中HBsAg和HBeAg水平的检测622.41.3HBcAbIG

8、对HeG2.2.15细胞分泌完整病毒颗粒的影响的.gpI26.4.2.2.4HepG2.2.15细胞培养上清的HBVDNA含量的检汲J42.4.3.HBcAbIgG对细胞内HBV复制的抑制作用662.4.3丄

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