植物乳杆菌饲料缓解铅对罗非鱼的毒性作用

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1、分类号密级硕士学位论文题目：植物乳杆菌饲料缓解铅对罗非鱼的毒性作用英文并列题目：TheprotectiveeffectsofLactobacillusplantarumfeedagainstleadtoxicityintilapia(Oreochromisniloticus)研究生：王汗成专业：食品科学与工程研究方向：食品生物技术导师：郭本恒教授级高工指导小组成员：田丰伟副教授学位授予日期：2015年6月答辩委员会主席：华欲飞教授江南大学地址：无锡市蠡湖大道1800号二○一五年六月摘要摘要采用新鲜浓缩湿菌体、冷

2、冻干燥菌粉和海藻酸钠包埋乳酸菌的不同加工方式，将植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum）CCFM8661作为添加剂加入到颗粒饲料中，使其活菌水平达到108CFU/g成品饲料，进行混合、制粒实验，探究其对植物乳杆菌CCFM8661活性的影响。试验结果表明，混合操作对三种不同益生菌添加方式下的活性影响不显著，制粒下，海藻酸钠微胶囊包埋益生菌的存活率显著高于其他两个组。将三种不同益生菌添加方式的饲料与制粒后进行益生菌喷涂的颗粒饲料在4°C和25°C（模拟室温）条件下进行两个月贮存实验。实验期间内各组

3、在4°C条件下益生菌活性较为稳定，25°C条件下，各组活性均有下降，海藻酸钠微胶囊包埋后益生菌活性下降速度显著低于其他三组。实验说明海藻酸钠微胶囊在制粒和后期贮存中显著保护了益生菌的活性。以罗非鱼（Oreochromisniloticus）为实验对象，将其分组建立空白对照组、铅暴露组、植物乳杆菌CCFM8661干预组和植物乳杆菌CCFM8661组，进行28天饲喂，记录体重和投饵量，实验结束后处死罗非鱼进行解剖，收集血液、肝胰脏、躯干肾、脾脏、肠、背部肌肉等组织器官检测不同器官的消化酶活性指标、重金属含量指标、抗

4、氧化能力相关指标、免疫相关指标、外周血细胞核形态变化及观察脏器显微结构变化。结果表明，植物乳杆菌CCFM8661组与空白对照组相比，在平均增重和日增重上显著提高；植物乳杆菌CCFM8661干预组与铅暴露组相比，显著提高了肠道淀粉酶和蛋白酶活力，说明植物乳杆菌CCFM8661对罗非鱼生长产生了促进作用，提高了因铅中毒而降低的消化酶活力。检测各个脏器重金属含量，植物乳杆菌CCFM8661干预组与铅暴露组相比，在躯干肾、肝胰脏、鳃、脑、性腺、背肌中重金属含量显著降低，在脾中，铅含量降低，对比实验数据发现，植物乳杆菌C

5、CFM8661能够有效的降低罗非鱼体内脏器的铅含量。此外，与铅暴露组相比，植物乳杆菌CCFM8661干预组的血清氨基乙酰丙酸脱水酶（ALAD）活性、肝胰脏和肾脏的还原性谷胱甘肽（GSH）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC）活性显著提高，而肝胰脏和肾脏的过氧化氢酶（CAT）活性和肝脏的丙二醛（MDA）含量显著降低，在肾脏的MDA含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性以及肝胰脏的SOD活性和金属硫蛋白（MT）含量中，两者差异并不明显。以上结果表明了植物乳杆菌CCFM8661在缓解铅中

6、毒引起的氧化应激和氧化损伤上产生了有益的作用。在免疫相关指标中，植物乳杆菌CCFM8661干预组和铅暴露组相比，血项指标差异不大，血清溶菌酶（LZM）含量和髓过氧化物酶（MPO）活性显著升高，而补体C3含量显著下降，免疫球蛋白M（IgM）含量有所下降，说明植物乳杆菌CCFM8661能缓解因铅中毒导致的罗非鱼体内的非特异性免疫能力下降。统计外周血红细胞核异形种类和数目，在各个种类的异形核数目上，植物乳杆菌CCFM8661干预组与铅暴露组相比显著下降，表明植物乳杆菌CCFM8661能够缓解遗传和细胞毒I摘要性。综合

7、以上的实验结果得到结论为：植物乳杆菌CCFM8661确有缓解罗非鱼体内铅毒性的作用。关键词：植物乳杆菌；罗非鱼；铅中毒；饲料IIAbstractAbstractThreeprocessingmethods,freshconcentratedbacterial,freezedriedbacterialpowderandsodiumalginatemicrocapsuleswereappliedtoaddLactobacillusplantarumCCFM8661asfeedadditivestothetilapi

8、adietpellettoexplorehowunitoperations,themixingandpelletization,influencetheprobioticactivity.Themixingeffectedtheprobioticactivitynotsignificantlyamongthethreeprocessingmethods,however,thepelle