浅黄分枝杆菌和母牛分枝杆菌感染鼠的细胞免疫变化规律研究

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1、分类号：S852.1单位代码：10193密级：无学号：2012605硕士学位论文浅黄分枝杆菌和母牛分枝杆菌感染鼠的细胞免疫变化规律研究ResearchoncellularimmunitychangeinM.gilvumandM.vaccaeinfectedmice作者姓名：齐花蕊学位类别：农学硕士专业名称：基础兽医学研究方向：分子免疫学指导教师：王春芳所在学院：动物科学技术学院2015年5月本研究由国家自然科学基金项目（No.31302124）资助，在此表示感谢！Thisresearchwasfinancia

2、llysupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(GrantNO.31302124)独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，

3、本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（

4、涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要目的：利用母牛分枝杆菌和浅黄分枝杆菌建立小鼠非结核分枝杆菌持续感染模型。分析感染小鼠体内的免疫细胞、细胞因子和组织病理随感染时间的动态变化。从而为探索非结核分枝杆菌感染的免疫学机制奠定基础。方法：选取雌性C57BL/6小鼠，经腹腔注射感染母牛分枝杆菌和浅黄分枝杆菌。分别于感染后2、7、14、21、28、

5、35天取材，称量肝脏、脾脏、肺脏重量并制作病理切片经HE染色观察感染小鼠器官的病理变化；通过荧光定量PCR检测肝脏和脾脏中IFN-γ、TNF-α、TGF-β、NLRP3、IL-12b和IL-106种细胞因子mRNA水平表达量的变化；采用流式细胞术检测脾脏CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的细胞比例。结果：1、经母牛分枝杆菌感染的小鼠在整个感染过程中，肝脏和肺脏可见明显的病理变化，感染后第7天，肝脏中这6种细胞因子的mRNA水平表达量达到了最低点，随后逐渐增加一直到第28天，脾脏仅诱导微弱的IL-10、TN

6、F-α、IL-12b和TGF-β的表达。CD4+T淋巴细胞的比例先降低后升高，CD8+T淋巴细胞的比例先升高后降低。2、经浅黄分枝杆菌感染的小鼠在整个感染过程中，肝脏、脾脏和肺脏均可见微弱的病理变化。肝和脾中IFN-γmRNA的表达逐渐增加。IL-12b在感染初期阶段持续降低，感染后第14天降至最低，随后逐渐升高。肝脏中IL-10的表达在感染后21天达到峰值，随后逐渐降低，而脾脏中IL-10在感染后14天达到峰值，之后显著降低。肝脏和脾脏中只诱导微弱的NLRP3、TNF-α和TGF-βmRNA的表达。CD4+

7、T淋巴细胞的比例先降低后升高，CD8+T淋巴细胞的比例先升高后降低。结论：1、母牛分枝杆菌感染组，小鼠肝脏中IFN-γ、IL-12b、IL-10、NLRP3、TNF-α和TGF-β6种细胞因子的表达量均显著高于脾脏，且肝脏显示明显的病理变化，表明肝脏的炎症反应比脾脏更强烈。2、浅黄分枝杆菌感染组，小鼠肝脏和脾脏内IFN-γ、IL-12b和IL-10均发挥明显的免疫效应，而NLRP3、TNF-α和TGF-β的表达量较低。3、CD4+、CD8+T淋巴细胞在非结核分枝杆菌感染过程中均发挥重要的免疫效应。关键词:浅黄

8、分枝杆菌，母牛分枝杆菌，T淋巴细胞，细胞因子，病理变化IAbstractObjective:Inthisstudy,weestablishedamousemodelforsustainednon-tuberculousmycobacterialinfectionusingMycobacteriumvaccaeandMycobacteriumgilvum,andanalyzedimmunecells,