猪胞内劳森氏菌lamp、pcr快速检测方法的建立及应用

《猪胞内劳森氏菌lamp、pcr快速检测方法的建立及应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＇－■■■主－－手：．尸六．：．＂’一＇‘一．，－Ｖ．？＇，－■Ｊ．一＇？备．■！．－＇．－？－－二心—一ｉ，；苗ｔ公《＊．；■．Ｖ當；，’－Ｓ５？具学号．１０９３３１１０分类号Ｓ８．Ｓ２０口６３＇ｙ＇＇－＇．＇＇ｊＮＶｖＶＶ．、’．Ａ：：為，Ｖ四川巧业大学＾专业顽±学位论文猪胞内劳森巧菌ＬＡＭＰ、ＰＣ民快速检测方法‘的建立及应用Ｉ－４罗露■．‘＇一：．占解，；，＇－指导教师颜其贵教授－校外

2、导师向贵友窩级兽医师，「、．气Ｖ：＇四川巨星集团，乂．式，＾学位类别兽医硕壬．如’＇．、＇．Ａ，。一／？／领域名称兽医！秦，、？，，，＂■研究方向动物微生物与免疫学．．一？，＇、．．？？＇－．＞．换．．’．，／■．．．．＇，－Ｘ，、＇．？－、、‘／？．ｖ＿？Ｉ一－－－－＾．＊＾，、、２０１５年０６月．、、‘．一、－－．占；；＊－？－？‘．＊．％，．Ｖ＇ｒ，：一？Ｉ巧■，ｃ

3、Ｖ■一－ｉ一－￣．？．．Ａ－．？■．＜、－Ａ．，？．＾＇－；：丫Ｖ，．＿、一一ｒ．弁；ＳｉｃｈｕａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＴｈｅｓｉｓｇＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄＡｌｉｃａ村ｏｎｏｆｐｐＬｏｏ－ｍｅｄｉａｔ：ｅｄＩｓｏｔｈｅｒｍａｌＡｍＵｆｉｃａ村ｏｎａｎｄｐｐＰＣＲｆｔ）ｒＲａｉｄＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＬａｗｓｏｎｉａｐＩｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｓＢＬｕｏＬｕｙＤｉｒｅ

4、ｃｔｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＹａｎＱｉｇｕｉＲｅｓｅａｒｃｈｄｉｒｅｃｔｉｏｎ：ＶｅｔｅｒｉｎａｒＭａｓｔｅｒｙ化ｎｅ２０１５论文独削性寅明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的＾。成果尽我所知，除了文中特别加圳示注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研巧成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＇研究生签名；年ｔ月幽＾緊心关于论文使用授

5、枚的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留＾，允许论文被查阅和借阅，可＞并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版［＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可１＾＾？用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研巧生签名：＞咬年日５复导师签名ｉｘ（月诉：辦如ｊ中文摘要猪増生性肠炎（Ｐｏｒｃｉｎｅｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｅｎｔｅｒｏｐａｔｈｙ，ＰＰＥ）是由于猪感染胞内劳森氏ｐ一１９ｉｅｓｔｅｏｈｗａｒｃｅ菌引起的种传染性肠道出血性的

6、消耗性疾病，３１年Ｂ和Ｓ首次报道了该病，１９７４年民ｏｗｌａｎｄ等证实了该病，该病现已成为世界上流行最广的猪病之一。虽然，猪増生性肠炎引起的死亡率不高，但由于其主要发病为慢性型，使得患病猪生长缓慢，饲料利用率和平均日增重明显下降，淘汰率上升，导致猪场经济损一失严重。些养猪业发达的国家和地区，由于饲料中抗生素的禁用或限用，导致猪増生性肠炎发病率逐年上升。在我国，临床猪増生性肠炎疑似病例有逐渐增多的趋势，但我国对猪增生性肠炎的研巧还处于起步阶段，缺乏对该病的流行病学调查，因此开发快速准确的临床检测方法对于该病的研究具有重要的意义。

7、本试验根据弓，针对胞内劳森氏菌ＡＭ１８０２５．２．１基因序列分别设计Ｉ物设计原理－ｍｅｄａｅｄｏｅｒｍａｍｃａｏｎ了ＰＣ民和环介导等温扩增技术。ｏｏｐｉｔｉｓｔｈｌａｐｌ近ｔｉ，ＬＡＭＰ）特异性引物ＰＣＲＬＡＭＰ、，通过对方法退火温度的优化，方法的反应温度、反应时间内外引物比例、ｄＮＴＰ浓度、镇离子浓度，、甜菜碱的优化确定其最优反应条件后成功建立了胞内劳森氏菌的ＰＣ民和ＬＡＭＰ两种检测方法。灵敏度实验结果表明建立３、的ＰＣＲ方法可检出的拷贝数为１０个，ＬＡＭＰ方法可检出的拷贝数为ｌＯＨ；特异性试验表明，ＰＣ民方法和ＬＡＭＰ方

8、法对Ｅ．ＣＯ／／、说加ｅｗｅ化７、ＰＥＤＶ、ＰＲＶ扩