木薯淀粉分支酶基因sbei的克隆、表达分析及rnai载体构建

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1、Ｈ｜：巧古单化ＨＰＩ■■皆韻－ｊ－７，，．木萬淀粉分支酶基因ｓＡｅｉ的克隆、表达分析及ＲＮＡｉ载体构建吴海宁■＇？■■＇？．？＇－－．？？？ｇＢＨ廣席乂聲？．．－分类号Ｓ３３１密级公开ＵＤＣ６巧硕±学位论文木墓淀粉分支酶基因ｓＡｄ的克隆、表达分析及ＲＮＡｉ载体构建吴海宁学科专业作物遗传育种指导教师罗兴录教授．１５．０６论文答辩日期２０１５．０５２４学位授予日期２０答

2、辩委员会主席周瑞阳教授广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除己特别加标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人一为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授极广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国

3、家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被査阅和借阅，可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可Ｗ采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于；□保密，在年解密后适用授权。曰不保密。＂＂请在＾１上相应方Ｖ１＾框内打（）论文作者签名／：日親與＜／．文指导教师签名￡７日期；：＾＾＾作者联系电话：电子邮箱；木著淀粉分支酶基因如ｅｉ的克隆、表达分析及ＲＮＡｉ载体构建摘要本研究Ｗ亲缘性相近的商淀粉木暮品种福选０１

4、（ＦＸ０１）和低淀粉木著晶种华南－１２４ＳＣ１２４）为试验材斜，运用ＲＴＰＣＲ扩增克隆技术分别克隆ＦＸ０１和ＳＣ１２４的淀粉分（’支酶基因础此并分析两个木薑品种站《基因序列的差异。运用炎光定量ＰＣＲ技术对？两个木塞品种的诚Ｗ在不同组织不同生育期里的表达量进行分析，并测定分析两个木專品种块根的淀紛分支酶活性、总淀粉含量Ｗ及支链、直链淀粉含量在不同生育期的变化情况，Ｗ探究木墓块根锭粉分支酶活性与块根淀粉合成的关系。研究结果表明：？１、本研究分别克隆了ＦＸ０１与ＳＣ１２４的姑Ｗ基因，经过比对分析后

5、得出两个木著品种的站ｄ基因序列与其编码的氨基酸无差异，其包含完整的开放阅读框２５５卵Ｐ，编码８５２个氨基酸。２、焚光定量ＰＣＲ结果表明，在整个生育期里ＦＸ０１的姑知表达量髙于ＳＣ１２４；在不同的组织里，木碧块根的姑《表达量要高于叶片和茎段；在块根膨大期时，木蓄的叶’片、茎段Ｗ及块根的站ｅ！表达量均达到最嵩。？３一、根据己克隆出的木著础Ｗ基因序列信息化及网络数据库，选取了段４２６咕的ＲＮＡ干扰片敌成功构建了诚ｅ－ｉ基因的ＲＮＡ干抗载体ＰＡＲＴ２７ＲＮＡｉ，其具有类似ｈｐＲＮＡ的发夹结构。

6、４ＦＸ０１块ＳＢＥ、在整个生育期中，离淀粉木蓄品种根的酶活性高于低淀粉木蓄品种ＳＣ１２４；在块根形成后期，两个木塞品种块根的ＳＢＥ酶活性均达到最高，此时两个木墓品种的总淀紛増加速率最快。５、既０１的块根总淀粉含量和支链淀粉含量比ＳＣ１２４的高，但是ＦＸ０１的块根直链淀粉含量却低于ＳＣ１２４。关键词；木蓄基因；克隆；定量表达；载体构建；ＩＣＬＯＮＩＮＧＡＮＤＵＡＮＴＩＴＡＴＩＶＥＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＡＮＡＬＹＳＩＳＱＯ？Ｆ如仍ＧＥＮＥＩＮＣ乂ＳＳＡＶＡＡＮＤＣＯＮ

7、ＳＴＲＵＣＴＩＯＮＯＦＲＮＡｉＶＥＣＴＯＲＷｕＨａｉｎｉｎｇ（ＣｏｌｌｅｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＧｕａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔＮａｎｎｉｎ５３０００４Ｃｈｉｎａ）ｇ，ｇｙ，ｇ，ＡＢＳＴＲＡＣＴＩｎｔｈｉｓｒｅｓｅａｒｃｈｔｈｅｃａｓｓａｖａｖａｒｉｅｔｏｆＦＸＯｌａｎｄｓｃ１２４ａｒｅｃｈｏｓｅｎａｓｔｈｅ化Ｓｔｍａｔｅｒｉａｌ．，ｙ－化ｃｈｎＷｅｕｓｅＲＴＰＣ民ｃｌｏｎｉｎｇｉｕｅｃｌｏｎｅｄｔｈｅｃａｓｓａｖａｆｒｏｍ

8、ＦＸＯｌａｎｄＳＣ１２４ａｎｄｔｈｅｎｑ，ｗｅａｎａｌｚｅｄｔｈｅｓｅｕｅｎｃｅｏｆｓｂｅｉａｎｄｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄＲＮＡｉｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒ．Ｗｅａｌｓｏｓｔｕｄｉｅｄｙｑｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｃａｓｓａｖａｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｄａｙｓａｎｄｔ