移植脂肪干细胞对血管损伤后内膜增生的影响及机制研究

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1、分类号：R541.4学校代码：10392学科专业代码：100201学号：2121003043硕士学位论文移植脂肪干细胞对血管损伤后内膜增生的影响及机制研究Effectoftransplantingadiposetissue-derivedmesenchymalstemcellsonintimalhyperplasiaaftercarotidballooninjury学位类型：医学硕士所在学院：第一临床医学院研究生：翁剑锐学科、专业：内科学（心血管病）导师：林志鸿副教授研究起止日期：2013年7月至2015年3月答辩委员会主席张彦定教授答辩日期：2015年06月04日二○一五年六月

2、论文目录英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71.1实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71.2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81.3主要设备与器械⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯82.方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82.1动物分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82.2干细胞制备与培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92.3腺病毒转染脂肪干细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92.4动物模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92.5颈动脉内膜病理检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102.6平滑肌细胞增殖检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112.7血清NO的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142.8颈总动脉eNOSmRNA检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯16结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯181.体外培养的ADMSC形态学表现⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182.大鼠颈动脉血管形态学改变⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯183.携带EGFP的腺病毒转染的脂肪干细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯194.荧光标记的脂肪干细胞在大鼠颈总动脉的定植⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯205.P21，P27，PCNA的变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯216.颈总动脉eNOS的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯257.血清中NO的水平⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37英文缩略词表ADMSCadiposetissue-derivedmesenchymalstemcells脂肪间充质干细胞DMEM-F12Dulbecco'sModifiedEagleMedia:NutrientDMEM-F12培养基MixtureF12eNOSEnd

6、othelialNitricOxideSynthase内皮型一氧化氮合酶EGFPgreenfluorescentprotein增强型绿色荧光蛋白ELISAenzyme-linkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附测定FBSfetalbovineserum胎牛血清HEstainingHematoxylin-eosinstainingHE染色MOImultiplicityofinfection感染复数MSCmesenchymalstemcells间充质干细胞PBSphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲液PCNAProliferatingCellNu

7、clearAntigen增殖细胞核抗原SDSpragueDawleySD大鼠1移植脂肪干细胞对血管损伤后内膜增生的影响及机制研究中文摘要目的：探讨移植脂肪干细胞对球囊损伤后大鼠颈动脉内膜增生的影响及其机制，为防治血管损伤后形成的再狭窄提供新的治疗思路。方法：45只雄性SD大鼠，随机分为3组：对照组（假手术），球囊损伤组，ADMSC组（球囊损伤+ADMSC移植治疗）。对照组仅予颈部切开缝合，球囊损伤组进行左侧颈总动脉球囊损伤，ADMSC组在血管损伤同时予以脂肪干细胞移植治疗。在术后