不同时机介入隔日限食疗法对脊髓损伤大鼠运动功能的影响.pdf

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1、成都中医药大学（养生康复学院）二0一八届硕士研究生学位论文不同时机介入隔日限食疗法对脊髓损伤大鼠运动功能的影响Theeffectofdifferenttimeinterventionevery-other-dayfastingonmovementfunctionafterratspinalcordinjury研究生姓名：陈洋指导教师：张安仁教授学科专业：康复医学与理疗学二○一八年五月学位论文不同时机介入隔日限食疗法对脊髓损伤大鼠运动功能的影响Theeffectofdifferenttimeinterventionevery-othe

2、r-dayfastingonmovementfunctionafterratspinalcordinjury陈洋指导教师姓名：张安仁教授申请学位级别：硕士专业名称：康复医学与理疗学论文提交时间：2018年4月论文答辩时间：2018年5月二○一八年五月成都中医药大学硕士学位论文中文摘要目的：建立大鼠钳夹型单侧颈髓损伤动物模型，采用隔日限食（every-other-dayfasting，EODF）进行干预，观察不同时机介入隔日限食对单侧颈髓损伤大鼠前肢运动功能的恢复和脊髓组织病理变化的影响，初步探索切合临床实际的隔日限食疗法治疗脊髓损伤

3、的有效介入时机。方法：1.实验分组：实验中大鼠随机分为如下六组：A组：假手术组，B组：脊髓损伤组，C组：预先4周EODF组，D组：即时干预EODF组，E组：延迟3天干预EODF组，F组：延迟7天干预EODF组。假手术组仅接受椎板切除术。EODF是禁食与自由摄食24小时交替进行，如此重复下去直至实验完成，全过程饮水不受限制。A、B两组术后均给予自由摄食（AL），饮水不受限。C组：脊髓损伤前4周进行EODF干预，且持续至观察周期结束；D组：脊髓损伤后立即进行EODF干预，且持续至观察周期结束；E组和F组：脊髓损伤后先给予自由饮食，分别延

4、迟3天、7天后再行EODF干预，且持续至观察周期结束。2.将96只SD大鼠随机分为A、B、C、D、E、F六组，每组16只，观察不同时机介入隔日限食对脊髓钳夹损伤模型大鼠脊髓组织病理变化和运动功能恢复的影响，实验周期为12周：观察各组大鼠术后进食量与体重变化；分别于术前1天及术后1天、术后第1、2、4、6、8、10、12周，采用不规则水平梯子试验、圆筒垂直攀爬试验、梳理试验评分评估大鼠前肢运动功能的恢复情况；术后第12周做苏木精-伊红染色和透射电镜观察各组大鼠脊髓损伤组织结构改变。结果：1.一般情况（1）摄食量：术前1-4周A、B、D

5、、E、F组大鼠均自由摄食，各组大鼠每日摄食量无统计学差异（P>0.05）；C组大鼠在进食日的摄食量显著多于各自由摄食大鼠（P<0.01）。术后12周中，C、D、E、F组大鼠在进食日的摄食量显著多于A、B组（P<0.01）。（2）体重：术后1周，B、C、D、E、F大鼠体重呈现出下降趋势，2周左右恢复至术前水平后又逐渐增加。术后12周，C、D、E、F组的体重均小于A、1成都中医药大学硕士学位论文B组（P<0.05）。2.不同时机隔日限食对脊髓损伤大鼠前肢运动功能恢复的影响行为学结果：(1)术后1-12周，A组无肢体功能障碍，B、C、D、

6、E、F组SCI后均明显表现为损伤同侧前肢运动功能障碍，A组与B、C、D、E、F组中的每一组相比较，不规则水平梯子试验、圆筒攀爬试验和梳理试验评分结果差异具有统计学意义（P<0.05），提示大鼠钳夹型脊髓损伤造模成功。(2)术后第2周起，C组大鼠的不规则水平梯子试验失误率明显低于B、D、E、F组（P<0.05）；C组大鼠的圆筒攀爬试验和梳理试验评分明显高于B、D、E、F组（P<0.05）。B、D、E、F组的三种行为学测试评分组间两两比较无显著性差异（P>0.05）。(3)术后第6-12周，6周时D、E组的大鼠圆筒攀爬试验和梳理试验评分

7、显著高于B组（P<0.05），8周时D、E组大鼠在水平梯子爬行的肢体失误率显著低于B组（P<0.05）。(4)术后第1-12周，与B组各时间点相比，F组大鼠不规则水平梯子试验、圆筒攀爬试验和梳理试验评分无显著性差异（P>0.05）。3.不同时机隔日限食对脊髓损伤大鼠脊髓组织结构的影响（1）HE染色观察可见：A组：脊髓神经元结构完整且清晰，未观察到神经元凋亡、炎细胞浸润及胶质细胞增生等现象。B、C、D、E、F组脊髓损伤区域出现不同程度神经纤维水肿且排列紊乱，伴有不同程度的淋巴细胞浸润和小胶质细胞增生。根据各组HE染色结果比较推测，C、

8、D、E组的的脊髓组织病理形态变化较B、F组明显改善，C组脊髓组织病理形态变化较D、E组改善，B组与F组无明显差异。（2）透射电镜观察可见：A组：有髓神经纤维的髓鞘完整，内外轴膜及轴索结构正常，核染色质分布均匀，胞质中线粒体分布较均匀，