高糖对人脐静脉内皮细胞cd26的表达及mbl补体激活途径的影响及作用机制

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1、中图法分类号：R5学校代码：10661学号：2012263密级：公开硕士学位论文（专业型学位）高糖对人脐静脉内皮细胞CD26的表达及MBL补体激活途径的影响及作用机制姓名：潘登专业：肾病风湿科研究方向：糖尿病肾病导师：颜晓勇教授培养单位：遵义医学院2015年5月遵义医学院硕士研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作

2、者签名：签字日期：年月日遵义医学院学位论文版权使用授权书本人完全了解遵义医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：遵义医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权遵义医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存学位论文，即：遵义医学院具有学位论文的数字化制品复制权，信息网络传播权和汇编权。保密的学位论文在解密后适用本授权书。学位论文作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日目录1、论文：高糖对人脐静脉内皮细胞CD

3、26的表达及MBL补体激活途径的影响及作用机制中英缩略词对照表………………………………………………………1中文摘要…………………………………………………………………2英文摘要…………………………………………………………………4前言………………………………………………………………………6材料与方法………………………………………………………………8结果……………………………………………………………………16讨论……………………………………………………………………29结论……………………………………………………………………32参考文献……………………………

4、…………………………………332.综述……………………………………………………………………363.致谢……………………………………………………………………464.作者简介………………………………………………………………47基金课题编号：贵州省科学技术基金项目（CK-825）号中英文缩略词表缩略词英文全称中文全称CD26DipeptidylpeptidaseIV二肽基肽酶IVMBLMannose-bindinglectin甘露聚糖结合凝集素DNDiabetesnephropathy糖尿病肾病MACMembraneattackcomplex膜攻击复合物H

5、UVECHumanumbilicalveinendothelialcell人脐静脉内皮细胞DMEMDulbecco'sminimumessentialmedium达尔伯克(氏)必需基本培养基NF-kBNuclearfactorkB核因子kBIL-6Interleukin-6白介素-6MASPsMBL-associatedserineproteases与MBL相关性丝氨酸蛋白酶RT-PCRreversetranscriptionPCR实时荧光定量PCRWBWesternBlot蛋白质印迹法DMDiabetesmellitus糖尿病GLP-1Glucag

6、onlikepeptide-1胰高血糖素样肽-1CRDCarbohydraterecognitiondomainC未端糖识别域PKCProteinkinaseC蛋白激酶CADAAdenosinedeaminase腺苷脱氨酶1高糖对人脐静脉内皮细胞CD26的表达及MBL补体激活途径的影响及作用机制中文摘要目的：观察高糖培养下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的CD26表达变化、甘露聚糖结合凝集素(MBL)补体途径的激活及炎症因子（IL-6和NF-kB）的表达情况，探讨CD26在糖尿病肾病（DN）慢性炎症发病机制中的作用，为CD26抑制剂治疗DN寻求基础研究

7、依据。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞，分别设置正常对照组（含葡萄糖5.5mmol/L），甘露醇组（含葡萄糖5.5mmol/L+甘露醇24.5mmol/L），高糖组（含葡萄糖30mmol/L）,采用免疫组织化学法检测细胞表面CD26、MBL、C3和膜攻击复合物(MAC)的表达，采用WesternBlot检测细胞的CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表达，采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)检测细胞中CD26、IL-6和NF-kBmRNA的表达情况。结果：⑴免疫组化提示：在HUVEC中CD26、MBL、C3、膜攻击复合物（MAC）主要表达于

8、胞膜和胞浆。高糖组CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表达均明显高于正常组与甘露醇组（P＜0.05）；在正常