grp78在卵巢癌细胞自噬与细胞凋亡中的作用研究

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1、分类号：R711.75学校代码：10062密级：学号：2012602442硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：GRP78在卵巢癌细胞自噬与细胞凋亡中的作用研究TITLEStudyontheeffectofGRP78onautophagyandapoptosisinovariancarcinoma一级学科：临床医学二级学科：妇产科学论文作者：李敏指导教师：瞿全新天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R711.75学校代码：10062密级：学号：2012602442学位类别：科学学位专业学位学科门类：医学硕士学位论文MAS

2、TER’SDISSERTATION论文题目：GRP78在卵巢癌细胞自噬与细胞凋亡中的作用研究TITLEStudyontheeffectofGRP78onautophagyandapoptosisinovariancarcinoma一级学科：临床医学二级学科：妇产科学论文作者：李敏指导教师：瞿全新天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所

3、做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日中文摘要目的本研究旨在探讨GRP78在卵巢癌细胞自噬与细胞凋亡中的作用及其作用机制，

4、了解其对卵巢癌细胞生长情况及对顺铂敏感性的影响，从而为卵巢癌的治疗提供新思路，为克服卵巢癌顺铂耐药提供新方法。方法本研究通过体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3，以GRP78调节因子BAPTA-AM、A23187分别下调、上调卵巢癌细胞中GRP78表达，以RT-PCR、WesternBlot蛋白印迹法分别检测SKOV3细胞中Beclin-1、Bcl-2、CHOPmRNA及其蛋白表达水平改变；以GFP-LC3-II荧光染色法观察细胞自噬水平变化；以AnnexinV-FITC法检测肿瘤细胞凋亡变化，以明确GRP78在卵巢癌细胞自噬与细胞凋亡中的作用；以MTT法

5、检测顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制率，了解GRP78对卵巢癌细胞生长情况及其对顺铂敏感性的影响。结果1.SKOV3细胞中GRP78对Beclin1、Bcl-2、CHOPmRNA表达的影响经GRP78调节因子BAPTA-AM和A23187分别下调、上调SKOV3细胞中GRP78表达后，卵巢癌细胞SKOV3中Beclin1mRNA的相对表达量分别为(0.86050.05478)、(0.65370.06500)，与对照组相对表达量(0.77240.02871)相比，差异有统计学意义(t=2.768，P<0.05；t=2.893，P<0.05)。B

6、cl-2mRNA的相对表达量分别为(0.71360.03230)、(0.90750.04730)，与对照组相对表达量(0.84500.01785)相比，差异有统计学意义(t=3.334，P<0.05；t=3.920，P<0.05)。CHOPmRNA的相对表达量分别为(0.81080.00380)、(0.61950.06148)，与对照组相对表达量(0.71160.07689)相比，差异有统计学意义(t=3.141，P<0.05；t=2.877，P<0.05)。2.SKOV3细胞中GRP78对Beclin1、Bcl-2、CHOP蛋白表达的影响

7、经GRP78调节因子BAPTA-AM和A23187分别下调、上调SKOV3细胞中GRP78表达后，卵巢癌细胞SKOV3中Beclin1蛋白的相对表达量分别为(0.95210.02238)、(0.63750.02489)，与对照组相对表达量(0.78900.08349)相I比，差异有统计学意义(t=3.268，P<0.05；t=3.012，P<0.05)。Bcl-2蛋白的相对表达量分别为(0.38540.03231)、(0.59560.02902)，与对照组相对表达量(0.49180.03551)相比，差异有统计学意义(t=3.810，P<0

8、.05；t=3.248，P<0.05)。CHOP蛋白的相对表达量分别为(0.68130.09