mir-132在脓毒症肺损伤小鼠中的保护作用及机制研究

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1、南昌大学医学院硕士学位论文miR-132在脓毒症肺损伤小鼠中的保护作用及机制研究专业名称：急诊医学（专业学位）作者姓名：黄彩雪指导教师：钱克俭摘要分类号：密级：UDC：学号：416523812287南昌大学专业学位研究生学位论文miR-132在脓毒症肺损伤小鼠中的保护作用及机制研究TheprotectionandmechanismofmiR-132insepticmicewithlunginjury黄彩雪培养单位（院、系）：南昌大学江西医学院研究生院指导教师姓名、职称

2、：钱克俭教授专业学位种类：临床医学专业领域名称：急诊医学论文答辩日期：2015年5月28日答辩委员会主席：徐方云评阅人：2015年5月1学位论文独创性声明一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名

3、（手写）：黄彩雪签字日期：2015年6月5日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表

4、，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：黄彩雪导师签名（手写）：钱克俭签字日期：2015年6月5日签字日期：2015年6月5日论文题目miR-132在脓毒症肺损伤小鼠中的保护作用及机制研究姓名黄彩雪学号416523812287论文级别博士□硕士√南昌大学江西医学院/系/所专业急诊医学院研究生院E_mail备注：√公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的:观察脓毒症肺损伤小鼠肺组织中miR-132的动态表达变化以及

5、肺内上调miR-132的表达后对胆碱酯酶及炎症反应的影响，探讨miR-132对脓毒症肺损伤小鼠的肺保护作用及机制。方法：1.选择雄性健康SPF级BABL/c小鼠；采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建小鼠脓毒症肺损伤模型，模型构建成功后，病理切片检测肺损伤程度；ELISA检测肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子的表达变化；计算肺湿干重比值；用RT-qPCR检测肺组织中miR-132的表达变化；用Westernblot检测肺组织AchE蛋白含量变化；T-CHE试剂盒检测BAL

6、F中AchE活性。2.选择气管内滴入invivo-jetPEITM介导的miR-132，转染成功后采用CLP构建脓毒症肺损伤模型，造模24小时后处死小鼠。留取左肺行肺泡灌洗，用ELISA检测BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子的表达变化；留取右肺，病理切片观察肺损伤程度，称量、烘干，计算湿干重比值，用RT-qPCR检测肺组织中miR-132的表达变化，用Westernblot检测肺组织AchE蛋白含量变化，T-CHE试剂盒检测BALF中AchE活性。结果：1.CLP能够成功构建脓毒

7、症肺损伤模型，病理结果显示造模6h小鼠开始出现肺损伤，损伤程度随时间延长而逐渐加重，24h小鼠肺损伤最严重；肺湿干重比值在CLP术后6h开始增加，肺水肿逐渐加重，24h肺水肿最严重，随后肺水肿逐渐减轻；BALF中炎症因子表达量在CLP术后逐渐增加，TNF-α表达于12h、24h达高峰，IL-1β、IL-6于24h达高峰，48h后均开始逐渐下降。2.脓毒症会诱导肺组织miR-132表达上调，CLP术后6h开始，miR-132的表达量逐渐升高，12h、24h达高峰（13.27±1.21倍、14.31

8、±1.24倍），48h开始下降。3.经气道内滴入invivo-jetPEITM介导的miR-132能够成功上调肺内的miR-132的表达，转染后24h表达达高峰；病理结果示转染组脓毒症小鼠肺损伤程度较假转染组减轻；肺组织水肿减轻；BALF中炎症因子表达下降，上调肺II摘要内miR-132能够降低脓毒症肺损伤小鼠的肺部炎症反应。4.脓毒症肺损伤模型构建成功后发现肺组织中AchE表达随CLP术后时间延长而逐渐增加，BALF中AchE活性亦增加；上调肺内miR-132后肺组织中AchE蛋白表达及BAL