与氮代谢相关的茶树dof转录因子发掘

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1、密'会及：论文编号:中囯农业j斗学P完学位论文与氮代谢相关的茶树DOF转录因子发掘DiscoveryofDOFTranscriptionFactorsAssociatedwithNitrogenMetabolisminTeaPlant硕士研宄生：胡娟指导教师：成浩申请学位类别：农学硕士专业：鮮研究方向：茶与箭I1培养单位••中国农业科学院茶叶研究所中国农业科学院研究生院2015年6月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研宂工作及取得的研宂成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或

2、撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研宄生签名：时间：扣6年y月1日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名

3、表论文题目与氮代谢相关茶树DOF转录因子发掘_茶树资源与论文作者胡娟专业茶学研宄方向育种指导教师成浩培养单位（研宄所）茶叶研宄所硕（博）姓名职称单位专业签名导师评硕导口博导口阅硕导口人博导□i-高其硕导口生物化学与研宄员浙江大学主康博导口分子生物学席骆耀硕导口教授浙江大学茶学导平博导口余继硕导口研究员杭州茶叶所茶学忠博导□Aam答王新硕导口中国农业科学院茶叶研宄员茶学超博导口研究所辩硕导口中国农业科学院茶叶陈亮研宄员茶学博导口研究所委硕导口博导口1员硕导口博导口!硕导口1博导口会议记录（秘书）1论文答辩时间地点2015年5月19日在茶叶

4、所3号楼4楼中型会议室密级:论文编号:中国农业科学院学位论文与氮代谢相关的茶树DOF转录因子发掘DiscoveryofDOFTranscriptionFactorsAssociatedwithNitrogenMetabolisminTeaPlant硕士研究生：胡娟指导教师：成浩申请学位类别：农学硕士专业：茶学研究方向：茶树资源与育种培养单位：中国农业科学院茶叶研究所中国农业科学院研究生院2015年6月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationDiscoveryo

5、fDOFTranscriptionFactorsAssociatedwithNitrogenMetabolisminTeaPlantM.S.Candidate：HuJuanSupervisor：ChengHaoMajor：TeaScienceSpecialty：TeaGermplasmandbreedingJune2015摘要茶树是一种采叶作物，为了提高茶叶产量，人们往往过量的施用氮肥。但是，这样不仅增加了农业成本，而且还造成了严重的土壤污染。尽管通过肥料深施、缓释性肥料等措施取得了一定的成效，但并不能从根本上解决问题。随着分子生物学的

6、发展，通过茶树氮代谢分子机制的研究发掘氮高效种质，成为科学研究的新方向。DOF(DNAbindingwithonefinger)转录因子家族在植物生长发育和基因表达调控过程中起着重要的作用，能够参与调控植物的碳氮代谢。为了探索DOF转录因子在茶树氮代谢中的作用，本研究从‘龙井43’叶片中克隆了6条Dof基因，并对其进行了生物信息学分析，利用实时荧光定量PCR技术，研究了在3个茶树品种中这些CsDofs基因对低氮和正常氮水平处理的响应，获得结果如下：（1）从氮胁迫转录组中筛选得到了一些Dof基因家族同源的EST片段，结合5’-和3’-RA

7、CE以及RT-PCR技术克隆得到6条茶树Dof基因cDNA全长序列，初步将其命名为CsDof1-6。生物信息学分析结果表明获得的这6个CsDofs编码的氨基酸序列均具有典型的DOF结构域，且为亲水性蛋白，不含有信号肽，定位于细胞核，均含有多个磷酸化位点。经Blastp同源比对分析发现6个CsDofs与其他植物中的DOF类转录因子具有较高相似性。将推导的茶树CsDofs基因氨基酸序列与拟南芥36个DOF蛋白氨基酸序列进行聚类分析，结果显示：CsDof1和CsDof2与拟南芥中受生物钟调控的AtCDFs(cyclingdoffactor）基

8、因聚为一个亚家族，因此进一步命名为CsCDF1和CsCDF2；CsDof4和CsDof5聚为一个亚家族。（2）实时荧光定量PCR技术检测了CsDofs基因在3个茶树品种根系、一芽两叶以及老叶中的表达水平，结