体外多酶催化确定乳酸合成途径关键酶的研究

《体外多酶催化确定乳酸合成途径关键酶的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、－Ｉ天津科技大学研究生学位论文＂（申请工程硕±专业学位）体外多酶催化确定乳酸合成途径关键酶的研究ＤＥＴＥＲＭＩＮＡＴＩＯＮＯＦＫＥＹＥＮＺＹＭＥＳＩＮＬＡＣＡＴＥＳＹＮＴＨＥ別ＳＰＡＴＨＷＡＹＴＨＲＯＵＧＨ－ＩＮＶＩＴＲＯＭＵＬＴＩＥＮＺＹＭＥＣＡＴＡＬＹ別Ｓ亩告人．■－．．：＇＇，．．．．ｉ，，一１’．‘．－Ｌ－，＇＇：‘一．；ｙ－為如．＇＾＇．，古，；；；辕；．？－‘．．；．＇．．Ｖ：苗社堪传／．工程领域名称：轻

2、工技术与工程（发酵）＂一一．．；常ｋ奪Ｖ，；＇■．．／Ｖ不，Ｊ＇．护章／呑．．指导教师：习爱坡教授／｜‘＇‘＇＾‘’＞’＇＇：：：苛，；。仇：，：规＇－＜Ｖ马红武研究员Ａ：；ｍ：．：＇．’曲研究生姓名：马春玲／．心Ｖ占＾打；誦‘一１申请学位类别：工程硕±全曰制每（）；敏＾達＇＇论文提交日期：遍年０３月發＇薦屬Ｉ通分类号：Ｑ８１５学校代码：１００５７：、密级：不保密研巧生学号：１３８０９９１３体外多醇傕化确定現酸合成途径关键酶的研巧Ｄｅｔｅｒｍ

3、ｉｎａｔｉｏｎｏｆＫｅｙＥｎｚｙｍｅｓｉｎＬａｃｔａｔｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓＰａｔｈｗａｙｔｈｒｏｕｈ－ｉｎｖｉｔｒｏＭｕｌｔｉｅｎｚｍｅＣａｔａｌｓｉｓｇｙｙ工程领域名称：轻工技术与工程研究方向：代谢工程指导教师姓名：习爱坡教授马红武研究员研巧生姓名：马春玲申请学位类别：工程硕±（全日制）论文提交日期：２０１６年０３月论文课题来源：国家级项目学位授予单位：天津科技大学天津科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进斤研巧工作所取得的成果。除

4、文中特别加标注引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果内容，也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文研巧做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：絲若日期；ｗ成年＾月Ｗ日知识产权和专利权保护声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在课题导师具体指导下并得到相关研究经费支持下完成的，其数据和研究成果归属于课题导师所在的单位。知识产权、创造性发明的专利权及使用权参照天津科技大学与中国科学院天津工业生物技术研

5、巧所签署的《关于联合培养硕±研究生的协议》及其实施细则执行。本人保证毕业后，Ｗ本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时仍参照《关于联爸培养硕：ｔ研究生的协议》及其实施细则执行。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：縣若曰期；年＾月＞１曰学位论文巧权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，同意公布论文的全部或部分内容，允许论文被查阅和借阅。本人授权天津科技大学和中国科学院天津工业生物技术研究所可Ｗ将本学位论文

6、的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密＂（请在方框内打小），在年解密后适用本授权书。［□本学位论文属于＂＂不保密［３（请在方框内打Ｖ）。作者签名：日期：Ｗ主日｝＾《年若月＇專據：日期导师签名：－乂年＾月叫日：：＾位％摘要，所代谢途径中的关键酶往往决定反应的速度ｌｕ关键酶的研究对于代谢途径的优一化具有重要的作用，，而糖酵解途径是切生物有机体中普遍存在的葡萄糖降解途径为其他代谢途培提供中间代谢产物，本文研巧的乳酸合成途径包括糖酵解途径和乳酸脱氨酶

7、一种通过体外代谢途径构建和分析确定。本研究基于代谢控制分析理论提出了。关键酶的方法，并应用其确定郭酸高产菌株中的关键酶首先获得高产菌株的粗酶液并测定葡萄糖到現酸合成途径中各种蛋白的绝对浓度，进而通过向粗酶液中分别添加同等比例的各纯酶对途径进行扰动，并由扰动前后的途径通量变化计算出各酶的通量控制系数Ｗ确定途径关键酶。通过上述方法本文获得了如下主要研巧结果：本文成功构建并表达了乳酸合成途径相关蛋白，经蛋白纯化得到纯酶，通过适合的酶偶联反应测定蛋白活性，在测定中发现果糖二磯酸醇缩酶（ＦｂａＡ）能够代替甘油酸－－－１３二３磯酸激酶

8、（Ｐ紙催化甘油酸，且发现这，憐酸到甘油酸麟酸两个基因有相同的一Ｐｋ，Ｊ？ＦｂａＡ操纵子，而ｇ是必需基因所