软骨寡聚基质蛋白基因薄膜对干细胞分化影响的研究

《软骨寡聚基质蛋白基因薄膜对干细胞分化影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：单位代码：浓银狄学号：冲、硕士学位论文中文论文题目：软骨寡聚基质蛋白基因薄膜对干细胞分化影响的研究英文论文题目：作者姓名郭鹏指导教师严世贵专业名称外科学研究方向骨科所在学院医学院论文提交日期：二零一四年十二月软骨寡聚基质蛋白基因薄膜对干细胞分化影响的研究指导教师签名：秀论文评阅人：吴立东主任医师浙大医学院附属第二医院评阅人：陈锱平主任医师浙江省人民医院评阅人：蔡迅梓副主任医师浙大医学院附属第二医院评阅人评阅人答辩委员会主席严伟琪教授浙大医学院附属第二医院委员王慧明主任医师浙江省口腔医院委员杨迪生主任医师浙大医学院附属第二医院委员王昌兴主任医师浙江省新华

2、医院委员何荣新主任医师浙大医学院附属第二医院委员答辩日期：年月日浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人巳经发表或撰写过的研究成杲，也不包含为获得浙江大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名签字日期：年《月曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权倮留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权

3、浙江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书）签字曰期：浙江大学硕士学位论文致谢致谢在本文的完成之际，我谨以最诚挚的敬意感谢我的导师严世贵教授年来在学习、工作、科研上对我的谆谆教诲，以及生活上的悉心关怀。严世贵教授严谨的治学态度、渊博的知识、创新的思维和高尚的人格给我留下了深刻的印象，并将使我终身受益。本研究从选题、立题、实验设计，到具体实验、结果分析，直至文章撰写和论文的修改都凝结了导师的心血和智慧的结晶。在严世贵教授的帮助下，我顺利完成了硕士研究

4、生阶段课程的学习和课题的研究。衷心感谢浙江大学医学院附属第二医院骨科吴浩波医师、蔡迅梓医师、师钟丽医师、赵翔医师及全体医生在工作和科研中的指导以及支持。衷心感谢应志敏、林调、史明敏、王卫、毕方刚、朱晗晓、沈跃、刘安、薛星河、陈云琳等师兄弟对我的实验提供了很多宝贵的意见和建议。感谢陶轶卿、李恒元、杜少华、李金、李冰皓、陈广南、杨孔贺、郑华伟等骨科研究所的兄弟们在实验过程、标本收集等方面给予的帮助和支持。感谢临床试验中心的各位老师在实验操作、数据釆集方面给予的指导和帮助。感谢室友和同学与我在生活和学习上共同奋斗。尤其是师钟丽老师在实验技术和方法上的认真指导，使我受

5、益匪浅。由衷地感谢我的父母、女朋友一直以来的无私奉献，他们给了我巨大的支持和鼓励，感谢他们并致以我最真挚和美好的祝福。最后，特别向论文评阅和答辩委员会的全体专家表示衷心的感谢。浙江大学硕士学位论文中文摘要软骨寡聚基质蛋白基因薄膜对干细胞分化影响的研究浙江大学医学院骨科硕士研究生郭鹏导师严世贵教授中文摘要背景：生物材料表面涂层已经被广泛应用于优化不同医疗器械的表面性能。生物活性分子的沉积以及材料表面机械性能的优化可以有效的调控细胞行为和命运。在材料表面沉积基因组分可以维持长时间的生物学功能，是非常有应用价值的方法之一。因此，表达、等生长因子的基因常被用来修饰材料

6、表面以促进成骨分化和骨形成。但是，基因功能化的材料促进生理性腱骨愈合鲜有研究。作为纤维软骨中重要的非胶原蛋白类细胞外基质，对细胞分化及维持软骨表型起到了重要作用。基因结合材料表面修饰技术可能可以发挥重要的生物学作用。第一部分多层薄膜的构建目的：构建基因多层薄膜并表征，检测基因多层薄膜的稳定性及生物学活性。方法：采用层层自组装技术构建基因多层薄膜，通过接触角检测对材料最外层亲疏水性能进行评估；通过检测的特征性紫外吸收来监测薄膜的组装进程；用扫描电子显微镜观察不同昆数薄膜表面的微观结构；通过缓冲液模拟生理条件检测薄膜稳定性；通过胰蛋白酶溶液检测薄膜的可降解性；将构

7、建的基因薄膜浙江大学硕士学位论文中文摘要与细胞共培养，通过绿色荧光蛋白表达水平检测转染效率及其与薄膜层数的关系。结果：随着透明质酸和层的交替组装，材料表面的接触角也在°到°之间交替波动；随着薄膜层数的不断增加，处特异性吸光度也增强；扫描电镜下空白基底非常光滑，而薄膜呈现出松散粗糙的微观结构，薄膜表面则相对更加致密平整；基因薄膜在缓冲液中很稳定，但是在胰蛋白酶溶液中能迅速地被释放出来；基因薄膜能成功转染细胞，而且转染效率随着薄膜层数的增加而提高。结论：本研究通过层层自组装技术成功地构建了多层基因薄膜，该基因薄膜在生理条件下很稳定，在酶存在时能迅速释放出来，且该基

8、因薄膜能成功转染细胞，具有生物学活性。