微生物发酵饲料在刺参养殖中的应用

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1、学校编码10390分类号S968学号201211908018密级硕士学位论文微生物发酵饲料在刺参养殖中的应用指导教师:陈政强mmm作者姓名:王世英申请学位级别:M±学科专业：水产养殖研宄方向:论文提交日期:2015年04月07日论文答辩日期:2015年06月13日学位授予单位:集_大学学位授予日期.•2015年06月答辩委员会主席:周时强孝女授论文评阅人:学术诚信声明兹呈交的学位论文，是本人在导师指导下独立进行的研宄工作及取得的研究成果。除文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研宄成果。本人依法享有和承担由此论文产生的权利和责任。声明人（签名^时间：>(S

2、.一‘外b保护知识产权声明本人完全了解集美大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。问思集美大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。作者（签名）导师（签名）：p七次时间：、丨,^,D硕士学位论文微生物发酵饲料在刺参养殖中的应用TheApplicationofMicrobialFermentedFeedinCultivationofSeaCucumberApostichopusJaponicus学科门类：农学作者姓名：王世英指导教师：陈政强副教授学科名称：水产养殖

3、学研究方向：学位授予单位：集美大学论文答辩日期：2015年6月13日微生物发酵饲料在刺参养殖中的应用摘要本文研究发酵海带对刺参的饲养效果，通过分析发酵海带蛋白含量的变化、发酵海带作为刺参饲料和饲料中添加壳寡糖对刺参生存与生长、消化酶活性及消化道菌群结构、刺参非特异性免疫机能等方面的影响来评价发酵海带作为刺参饲料的营养价值与开发前景，除此之外，文中还就发酵海带的条件优化、海洋酵母的筛选鉴定等内容进行阐述，具体研究结果如下：1、人为添加枯草芽孢杆菌进行海带发酵，其适宜发酵温度为30℃、适宜发酵时间为896h，接种剂量为12%（w/v，10cfu/mL），发酵后海带的粗蛋白含量为14.65%，相对提

4、高15.17%。配合饲料中添加30%的发酵海带喂养刺参，在36d饲养时间内能显著提高刺参特定生长率、血淋巴液溶菌活性、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、酸性磷酸酶活性（ACP）、蛋白酶活性和淀粉酶活性（P<0.05），但是对刺参体腔细胞数、纤维素酶活性无显著影响（P>0.05）。此外，投喂发酵饲料还可见刺参消化道异养菌总数、弧菌相对数6-16量降低、芽孢杆菌相对数量升高等现象：异养菌总数由3.23×10cfu.ɡ减少至2.86×10-1cfu.ɡ，弧菌相对数量由36.68%降低为26.82%，芽孢杆菌由8.92%升至15.01%。2、以黑曲霉发酵海带，适宜发酵温度为34℃，发酵时间120h，

5、接种剂量10%（w/v，810cfu/mL），发酵后海带的粗蛋白含量为16.53%，相对提高27.64%。配合饲料中添加30%的发酵海带喂养刺参，在36d的试验性养殖时间内能显著提高刺参特定生长率、血淋巴液溶菌活性、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、酸性磷酸酶（ACP）活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性（P<0.05），但是对刺参体腔细胞数、纤维素酶活性无显著影响（P>0.05）。此外，投喂发酵饲料使刺参肠道异养菌总数、弧菌占总菌数比例低于原有水平。异养菌总6-16-1数由3.23×10cfu.ɡ减少至2.76×10cfu.ɡ；弧菌相对数量由36.68%降低为29.12%。3、从自然海水中和刺参肠

6、道中分离、筛选出6株酵母菌，运用生理生化和分子生物学方法对其进行鉴定，结果是：HS-1为汉逊德巴利酵母（Debaryomyceshansenii），HS-2为酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae），H-4为胶红酵母（Rhodotorulamucilaginosa），H-5为双倒卵形红冬孢酵母（Rhodosporidiumdiobovatum），H-10为中国汉纳酵母（Hannaellasinensis），H-12为海滨红酵母（Rhodotorulamarina）；采用凯氏定氮法测定其粗蛋白含量等指标，结果显示：HS-1的生物量（g/L）及蛋白质含量(w/w)分别为5.95、

7、33.131，HS-2分别为6.22、35.972，H-4分别为4.45、44.424，H-5分别为5.82、50.674，H-10分别为4.65、44.381，H-12为4.35、44.871，其中H-5的粗蛋白含量显著高于其他菌株（P<0.05）。选取双倒卵形红冬孢酵母发酵海带，经测定，其粗蛋白含量为14.51%，相对提高11.50%。配合饲料中添加30%的发酵海带喂养刺参，在36d的试验期限