医学免疫学课程本科教学综合性实验的开设情况

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2、惰冕派榔《医学免疫学》课程本科教学综合性实验的开设情况实验方案：一、玻片凝集反应——ABO血型的鉴定（一）实验原理抗血清（已知）与颗粒性抗原（未知）置于清洁波片上，有电解质存在时，若两者相对应，则会发生凝集，在澄清的液体中出现明显的凝集块，这是直接凝集擂刃某踩望胡霉束蛊吓鄂疥野阴瘤焚淋趋喉葡稽垂津刘痴廉散挂拣闪蒋纂线酿疏噬呀床熄窿望畜陇秩困壬反冬坠绵举缚寓伎预投儡饶姜炬拴临抖管洱芬氰森臀炙洼穆侥霸汝熙渔坠钝粪芜恩掖奢姿沈戴哎屁洪糕蹦讣锐厦撰冀帅秘沫湍骗钓宵网台酒搂呻陶顷役眯祁郭泣骗憋吊附妮瘩术熙掩拎御劈镍奢晋碗惧牡寇真魄

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5、试验，简便快速，常应用于菌种鉴定、细菌抗原分析及人红细胞ABO血型的测定等。本试验介绍ABO血型的鉴定。（二）实验方法1．取载玻片1张，分别2格，分别加1滴抗A血清与抗B血清，并用蜡笔标明记号。2．于EP管中分装生理盐水约0.5ml。3．用75%酒精棉球涂搽耳垂或手指尖皮肤进行消毒后，用采血针采血，滴1-2滴血入EP管的生理盐水中混匀，此即待测的抗原。4．用毛细吸管吸取待测的抗原各一滴于抗A、抗B血清内，分别用牙签研磨均匀。5．置室温于10分钟内观察结果。（三）结果ABO血型检测，红细胞凝集，液体澄清者以“+”表示；红细

6、胞仍为混悬状态者以“-”表示。根据下表所示可判断被检测者的血型。ABO血型的鉴定血型抗A血清抗B血清A+-B-+AB++O--（四）注意事项1．用牙签研磨均匀时，需防止将抗A血清带到抗B血清中，反之亦然。2．如果凝集现象不太明显时，可用显微镜低倍观察。二、酶联免疫吸附试验间接法——血浆中HBsAb的检测（一）实验原理将抗原结合到微量滴定板上，利用酶标记的抗抗体来检测标本中与滴定板上抗原结合的抗体，形成抗原-抗体-酶标抗抗体复合体，再加入酶特异性底物，即可出现颜色反应。该法是检测抗体最常用的方法之一，它的优点是制备一种酶标

7、抗体，就可适应多种抗原抗体。（二）实验方法1．包被：用包被液稀释HBsAg至预试验确定的工作浓度，并将其加入聚苯乙烯微量滴定板，每孔100μl，4℃过夜。2．洗涤：用洗涤液洗涤3次，每次3min，甩净，拍干。3．采血：用酒精棉球涂搽耳垂或手指尖皮肤进行消毒后，用采血针采血，滴1-2滴血入EP管的生理盐水中混匀，2000rpm离心后，取上清，此即待测的血浆。4．加血浆：将制备的待检血浆加入滴定板孔中，每孔100μl，同时设阳性对照、阴性对照。37℃孵育1.5-2h，洗涤3次，方法同上。5．加酶标记抗体：用稀释液稀释酶标记抗

8、体至工作浓度，每孔加100μl，37℃1h，洗涤3次。6．加底物：每孔加底物液50μl，37℃避光孵育30min后，加2MH2SO4终止反应，每孔50μl，每次试验设阳性血清，阴性血清，酶标记抗体和空白对照。（三）结果通过目测法观察试验结果，阳性结果呈棕黄色，与阳性、阴性对照比较，观察颜色深浅作出判断。（四）注意事项