Survivin基因在增殖性玻璃体视网膜病变增殖膜中的表达

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1、Survivin基因在增殖性玻璃体视网膜病变增殖膜中的表达作者：王俊艳，颜华，王世忠，李金茹，刘皓【关键词】Survivin基因；,,增殖性玻璃体视网膜病变；,,增殖膜　　摘要：目的：观察Survivin基因在增殖性玻璃体视网膜病变增殖膜中的表达。方法：取已确诊为PVR并行玻璃体切除术患者的PVR增殖膜，标本于术后立即由贮液瓶取至无菌器皿冰温运回，取出增殖膜放入多聚甲醛固定，并常规乙醇脱水，二甲苯透明、浸蜡、包埋、制备5μm连续切片，将切片行常规H-E染色，采用Survivin多克隆抗体（抗人及抗兔）行免疫组织化学实验，

2、检测Survivin基因在玻璃体和增殖膜中的表达。结果：Survivin基因在PVR增殖膜中呈阳性表达，且随着PVR临床分级的增高，免疫组织化学染色阳性细胞百分率逐渐升高。结论：认为PVR的形成是由于Survivin基因的异常表达促进了细胞增殖，阐明PVR的形成机制。　　关键词：Survivin基因；增殖性玻璃体视网膜病变；增殖膜　　ExpressionofSurvivinGeneinPeriretinalMembranesofProliferativeVitreoretinopathy6　　Abstract：Objec

3、tive:Tostudytheexpressionofsurvivingeneinperiretinalmembraneofprliferativevitreoretinopathy(PVR).Method:14periretinalmembranesobtainedfrom14casesofPVRwithretinaldetachmentundergoingvitretomywereusedtoexaminetheexpressionofsurvivinggenebySABCmethod.Result:Survivin

4、genewasexpressedin8ofthe14cases.Thereactionsofsurvivingwereobservedinthecytoplasmandextracellularmatrix.Conclusion:Theabnormalexpressionofsurvivinggeneinhibitsapoptosisanditmayparticipateintheprogressionofproliferativevitreoretinopathy.　　Keywords：Survivin；Prolife

5、rative；Vitreoretinopathy增殖性玻璃体视网膜病变（proliferativevitreoretinopathy,6PVR）是指在裂孔源性视网膜脱离或视网膜复位手术后，由于视网膜色素上皮细胞及神经胶质细胞的增生和收缩，又造成牵拉性视网膜脱离的病变。如不及时治疗，终将导致全视网膜脱离而失明。经过大量的实验和临床研究，已认为PVR属于眼内发生的过度损伤修复反应，这是一个以时相为特征的程序化过程，即经过了炎症期、增生期和瘢痕期，其形成的确切机制尚未完全明了。PVR的病理特征是细胞过度增生［1］。细胞增生与死

6、亡失衡可能是PVR形成的原因。Survivin是一个新发现的凋亡蛋白抑制剂家族成员，广泛表达于人的胚胎组织和各种肿瘤组织，但仅在少数正常成人组织中表达［2,3］。Survivin具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双重功能，是联系细胞周期和细胞凋亡界面的重要因子［4］。　　1资料和方法　　1.1一般资料：2004年7月至2005年6月确诊为孔源性视网膜脱离合并PVR并行玻璃体手术的病人14例。排除外伤性、糖尿病等引起的继发性视网膜脱离和系统性疾病。从玻璃体手术中取视网膜表面增殖膜，标本于术后立即由贮液瓶取至无菌器皿冰温运

7、回，取出增殖膜放入多聚甲醛固定，并常规乙醇脱水，二甲苯透明、浸蜡、包埋、制备5μm连续切片，将切片行常规H-E染色，采用Survivin多克隆抗体，行免疫组织化学实验，检测Survivin基因在玻璃体和增殖膜中的表达。　　1.2方法：石蜡切片常规脱蜡至水，3%H2O237℃，30min，以阻断内源性过氧化物酶活性，正常兔血清湿盒内37℃封闭20min；滴加羊抗人survivin多克隆抗体，湿盒内4℃过夜，漂洗；滴加生物素化兔抗山羊IgG，湿盒内37℃，20min，漂洗；滴加SABC复合物，湿盒内37℃6，20min，漂洗

8、；DAB显色，显微镜下观察，水洗中止反应；脱水，透明，封片。将已知的乳腺癌切片作为阳性对照，用磷酸缓冲液代替一抗作为隐性对照，以组织切片背景清晰、胞质或胞核染为淡黄至黄棕色者为阳性细胞标志。将阳性细胞按显色强度分为3级：表达弱阳性，即显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色染色；表达强阳性，即多数细胞呈黄至棕黄色染色