缺氧诱导因子1信号通路对缺氧肺动脉平滑细胞增殖和凋亡的影响

《缺氧诱导因子1信号通路对缺氧肺动脉平滑细胞增殖和凋亡的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南华大学硕士学位论文缺氧诱导因子1信号通路对缺氧肺动脉平滑细胞增殖和凋亡的影响姓名：李炽观申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：戴爱国20030520李炽观南华大学硕士学位论文缺氧诱导因子1信号通路对缺氧肺动脉平滑细胞增殖稻凋亡的影晌研究生举炽观导拜簸爱国教授中文撼要目的：以缺氧离体培养的大髋悻动脓平滑瓤缨胞(P矗s粥)为磷究对象，研究缺氧对大鼠PASMC增殖和凋亡的影响，同时检测丝裂原活化蛋白激酶／细胞外信号调节激酶(姒PK／ERK)翡激酶(缎)挪裁裁P098059、一氧化氮会酶(哟辞的镩截剂亚硝基左旋精氨酸(L—NAM

2、E)、肾上腺徽质素(ADM)对缺氧火鼠PASMC增殖和凋亡的影响；探讨姣氧PASMC之缺氧诱导透子一la(HIF-I8)的蛋囊表达以及P-ERKmiNOS的蛋白表达，同时观察PD98059，L-NAME，ADM对HI卜la、P-ERK。、iNOS的蛋白表达的影响；以探讨缺氧性肺动脉高压(HPH)中HIF-1豹可能信号通路机割及作用，为HPH的发瘸机制提供新的理论依据。方法：i、PASMC纲胞培养：采翊酶消化法培养雄性sD大鼠PASMC，取3q代细胞作为实验细胞。2、实验分组：设计常氧组N(20％0。)：低氧组H(1％02+5

3、％c魄+平衡氮)：低氧十ADM组H+A(1％0：+5％C0：+平衡氮，A蹦终浓度为1×lO-'mol／L)，低氧+L-NAME缀H+L(1链如+5lj6e饶+平衡氮L-NAME终浓度为】×lO”mol／L)，低氧+PD98059组H+P(1％02+5忱02+平衡氦，PD98059终浓度为5x1011mol／L)。各实验组设计缺氧24夺辩点俸增殖和凋亡的检测：设计4小对、8小时、24小辩三个黠阕点作缺飘处理检测蛋白表达，同时于缺氧8小时点加PD98059、ADM、L-NAME作干扰处理检测对蛋白表达的影旗。3、掰MTT法溅定缎

4、藏增殖数鼹情况。4、熙拳定量免疫细胞化学法测定增殖细胞核抗原(FCNA)的表达。5、采用流式细胞仪法检测细胞凋亡情况。6、WeStenblot蛋白印迹法检测缺氧诱导HIF—ld、P-ERK。、iNOS的臻垒表达，检测ADM、L-NAME、PD98059对缺氧诱导HI卜1a、P-ERK。小iNOS的蛋白表达的影响。誊炽观南华大学硕士学位论文结果1、采嗣MTT法发理，姣氧24，l、鼹组豹矗馥明显褰予常氧组(P0

5、．05)，缺氧+L～N捌8组h蓬骥显离子缺氧组秘卷氧组(pO，05)。4

6、、westen—blot发现常氧缀大鼠PASMC见少量HIF-1Ⅱ表达，缺氯4小时后表达增高(PO．05)；A喇对缺氧诱导HI卜lq的袋达有抑制作用(P

7、能抑制缺氧诱导HI卜ln蟹自的表达(PO．05)。ADM促进了缺氧诱导iNO$鬣鑫懿表选(P<0。oi)。L-NAME薅iNOS鬣自戆衷遮没有影羲。PD98

8、059季牵懿T缺氧诱导iNOS鬣白的表达(P