厚荚相思离体快繁技术的研究

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1、福建农林大学二零零菇届娥。k辨究生学俺沧文摘要厚葵相思离体快繁技术的研究厚英相思是近年来我国南方引进的主要营林树种之一，它具有适应性强、速生丰产、改良土壤、用途广泛等特点。目前，厚英相思优良种茁供应不足，无法满足营林生产的需求，而利用离体快繁技术实现厚荚相思工厂化育茁是解决此问题的一条较佳途径。因此，本试验以厚英相思半同胞良种66和29为试材，针对厚荚相思离体快繁体系，从良种无菌萌发、无菌苗继代培养、试管苗生根诱导、生根苗炼茁移栽直到移植成活的各个环节展开研究，探讨各个环节的较佳培养基及技术关键，分析在培养过程中玻璃化现象产生的影响因素，并从叶细胞超微结构入手分析玻璃化

2、茁叶细胞超微结构与正常组堵苗的差异，进而全面优化厚荚相思离体快速繁殖体系，为实现厚荚相思高效工厂化育苗提供必要的理论基础。1．本试验筛选出了厚荚相思良种无菌萌发过程中的较佳实验处理，依次是预处理方式Y，：用沸水浸泡种子20rain后到去水，再重复两次用沸水浸泡20min一消毒方式x2：先75％的酒精浸泡30s，再6％次氯酸钠溶液浸泡8．15min，再O．1％升汞浸泡3-6min，最后无菌水冲洗4遍一接种方式J2：种子的胚芽端向下接种i采用培养基形式S。：浅层液体培养基形式(下层为固体培养基MS+涪性碳1．09／L，上层为液体培养基MS)。2．通过分析厚荚66无菌苗在第一

3、次继代培养基CI．C9上的生长状况，筛选并预测出较佳培养基C10．改良MS(NI山N031000rag／L)+NAA0．4mg／L+IAA0．05mg／L。厚荚66和厚荚29两个家系无菌苗在培养基CIo的生长状况，证实培养基C．o是第一次继代培养的较佳培养基。通过比较无菌萌发不同时间的厚荚66无菌苗在培养基C—o中的生长情况，发现萌发30d的无菌苗是第一次继代的较佳材料。3．将培养基Clo中的厚荚66一代试管苗转接到第二次继代培养基D1．D8中，筛选出较佳培养基D8：改良MS(NH4N031000mg／L)+BAl．0mg几+KTI．0mg／L+NAA0．4mg，L+活

4、性碳2．09，【J+蔗糖409／L。试验发现采用培养基C10和培养基D8交替培养的继代方式继代效果较佳。4．将厚荚66无根试管苗接种在诱导生根培养基Gi-G8中进行生根诱导，筛选并预测出较佳培养基G9：1／2MS+IBA0．5mg／L+NAA0．5m扎+蔗糖109／L。厚荚66和厚荚29在培养基G9生根状况，证实培养基G9是诱导生根的较佳培养基。不同继代次数的厚荚66在培养基Q的生长状况说明，随着继代次数的增加，诱导生根的难度增大；从培养基Clo继代来的试管苗比来源为培养基D8的试管苗更易诱导生根。5．相对于田园土基质、水屑基质，成分为细沙：田园土：蛭石=I：1：1的基

5、质是厚荚相思生根苗的最佳移栽基质，生根诱导培养21-28d的厚荚相思试管苗移栽后成活率较高，效果较好。6．厚荚相思玻璃化现象中，BA对玻璃化率的影响最显著，BA浓度越高玻璃化率越高。KN03在0—2000mg／L范围内，浓度越高玻璃化率越高，为3000mg／L时，厚荚相思离体快繁技术的研究玻璃化率下降。蔗糖、琼脂和KT的浓度越高玻璃化率越低，呈负相关。NAA在0--0．2mg／L范围，其浓度和玻璃化率呈正相关；为0．3mg，L时，玻璃化率降到最低。IAA对玻璃化率的影响与NAA完全相J司。NIL+浓度为0时玻璃化率最低，在700-2100mg／L时玻璃化率较高。透气性较

6、好的塑料瓶和适宜的光照条件可以降低玻璃化率。7通过透射电子显微镜观察厚荚相思玻璃化组培苗和正常纽培苗叶细胞超微结构的变化情况，结果表明：在超微结构上玻璃化苗与正常苗叶细胞具有明显差异。与正常组培苗相比，玻璃化苗的液泡膨大，空泡化严重，内含物稀薄；叶绿体数量较少，且形态变化较大，多数呈部分解体状态；线粒体数目少，膨胀变形，嵴突少、排列紊乱，伴有空泡化；细胞间间隙变大，胞问联系稀疏。8．在优化厚荚离体快繁体系基础上，通过一系列理论推导，提出了年繁殖倍数、生根茁年产量、商品苗年产量的估算公式。据公式估算：1009厚荚相思66良种商品苗年产量可达1046344株，每年效益可达到

7、15．7万元，经济效益可观。关键词：厚荚相思离体培养玻璃化再生植株登毽塞整盔兰三至墨茎堡堡主壁鍪皇兰垒鲨奎ABSTRACTStudyoninVitroRapidPropagationTechniqueofAcaciacrassicarpaAcaciacrassicarpaistheoneofmainforestationtreespeciesintheSouthof0urcountrywhichwasimportedinrecentyears．Acaciacrassicarpahasgoodadaptation，highyieldandg