氨基酸发酵生产工艺学

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1、氨基酸发酵的工艺控制培养基pH温度氧培养基1、碳源:淀粉水解糖、糖蜜、醋酸、乙醇、烷烃碳源浓度过高时,对菌体生长不利,氨基酸的转化率降低。菌种性质、生产氨基酸种类和所采用的发酵操作决定碳源种类2、氮源:铵盐、尿素、氨水同时调整pH值。营养缺陷型添加适量氨基酸主要以添加有机氮源水解液。需生物素和氨基酸,以玉米浆作氮源。尿素灭菌时形成磷酸铵镁盐,须单独灭菌。可分批流加。氨水用pH自动控制连续流加3、合适C/N氮源用于调整pH。合成菌体。生成氨基酸,因此比一般微生物发酵的C/N低。4、磷酸盐:对发酵有显著影响。不足时糖代谢受抑制。5、

2、镁:是已糖磷酸化酶、柠檬酸脱氢酶和羧化酶的激活剂,并促进葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活力。6、钾:促进糖代谢。谷氨酸产酸期钾多利于产酸,钾少利于菌体生长。7、钠:调节渗透压作用,一般在调节pH值时加入。8、锰:是许多酶的激活剂。9、铁:是细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的活性基的组成分,可促进谷氨酸产生菌的生长。10、铜离子:对氨基酸发酵有明显毒害作用。11生长因子:生物素作用:影响细胞膜透性和代谢途径。浓度:过多促进菌体生长,氨基酸产量低。过少菌体生长缓慢,发酵周期长。与其它培养条件的关系:氧供给不足,生物素过量时,转化俄为乳酸

3、发酵。种类:玉米浆、麸皮水解液、甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜为来源。pH对氨基酸发酵的影响及其控制作用机理:主要影响酶的活性和菌的代谢。控制pH方法:流加尿素和氨水流加方式:根据菌体生长、pH变化、糖耗情况和发酵阶段等因素决定。控制:(1)菌体生长或耗糖慢时,少量多次流加尿素,避免pH过高(2)菌体生长或耗糖过快时,流加尿素可多些,以抑制菌体生长。(3)发酵后期,残糖少,接近放罐时,少加或不加尿素,以免造成氨基酸提取困难。(4)氨水对pH影响大,应采取连续流加。温度对氨基酸发酵的影响及其控制菌体生长达一定程度后再开始产生氨基酸,因此菌体生

4、长最适温度和氨基酸合成的最适温度是不同的。菌体生长温度过高,则菌体易衰老,pH高,糖耗慢,周期长,酸产量低。采取措施:少量多次流加尿素,维持最适生长温度,减少风量等,促进菌体生长。氧对氨基酸发酵的影响及其控制要求供氧充足的谷氨酸族氨基酸发酵:生物合成与TCA循环有关。适宜在缺氧条件下进行的亮氨酸、苯丙氨酸和缬氨酸发酵:菌体呼吸受阻时产量最大。供氧不足时产酸受轻微影响的天冬氨酸族氨基酸发酵发酵工艺实例介绍谷氨酸一、概述工业化生产开始于由水解小麦面筋或大豆蛋白质而制取。1957年,日本率先采用微生物发酵法生产,并投入大规模工业化生产

5、,这是被誉为现代发酵工业的重大创举,使发酵工业进入调节代谢的调控阶段。目前世界产谷氨酸钠210吨/年,占氨基酸总量的2/3。我国现有50余家生产,年产量达160万吨万吨,居世界首位。二、谷氨酸的生物合成机理1.谷氨酸(-氨基戊二酸)OC-OH第一代鲜味剂H2N-C-HL-谷氨酸单钠盐——味精H-C-HH-C-HH-COOHL-型葡萄糖中间产物a-酮戊二酸谷氨酸谷氨酸脱氢酶NH4+抑制2.谷氨酸的生物合成(1)EMP:丙酮酸,ATP,NADH2(2)HMP:6-磷酸果糖3-磷酸甘油醛NADPH2:-酮戊二酸还原氨基化必需的供氢

6、体。(3)TCA循环:生成谷氨酸前体物质-酮戊二酸。(4)CO2固定反应:补充草酰乙酸。(5)乙醛酸循环:使琥铂酸、延胡索酸和苹果酸的量得到补充,维持TCA循环的正常运转。谷氨酸脱氢酶(6)还原氨基化反应:-酮戊二酸谷氨酸丙酮酸回补反应3.谷氨酸生产菌的生化特征(1)有苹果酸酶和丙酮酸羧化酶。(2)-酮戊二酸脱氢酶活性弱,异柠檬酸脱氢酶活性强,异柠檬酸裂解酶活性弱。(3)谷氨酸脱氢酶活性高,经呼吸链氧化NADPH2的能力弱。(4)菌体本身利用谷氨酸的能力低。4.谷氨酸产生菌(全是细菌)棒杆菌属北京棒杆菌C.pekinens

7、eCorynebacterium钝齿棒杆菌C.crenatum谷氨酸棒杆菌C.glutamicum短杆菌属黄色短杆菌B.flvumBrevibacterium产氨短杆菌B.ammoniagenes小杆菌属嗜氨小杆菌M.ammoniaphilumMicrobacterium节杆菌属球形节杆菌A.globiformisArthrobacter共同点:1)革兰氏阳性。2)不形成芽孢。3)没有鞭毛,不能运动。4)需要生物素作为生长因子。5)在通气条件下产谷氨酸(需氧微生物)。三、谷氨酸发酵的工艺控制培养基1.碳源:淀粉水解糖、糖蜜、乙醇

8、、烷烃(1)淀粉水解糖的制备(2)糖蜜原料(1)淀粉水解糖的制备:酸水解1、调浆:干淀粉用水调成淀粉乳,加盐酸0.5-0.8%至pH1.5。2、糖化:蒸汽加热,加压糖化25min。冷却至80℃下中和。3、中和:烧碱中和,至pH4.0-5.04、脱色:活性炭脱色和

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