人工接种后稻曲病菌在水稻穗部增殖状况观察和检测

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1、第7卷第3—4期菌物研究Vo1．7No．3．42009年11月JournalofFungalResearchNov．2oo9人工接种后稻曲病菌在水稻穗部增殖状况的观察和检测蔡洪生，周永力～(中国农业科学院作物科学研究所农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程，北京100081)摘要：采用显微观察和PCR检测分析了人工接种后稻曲病菌在水稻穗部的增殖状况。结果表明：分生孢子萌发后产生的菌丝首先附着在花粉上或花丝上，柱头上未发现有菌丝附着；后期(接种后8d)在柱头上有附着菌丝的花粉粒。显微观察和PCR检测结果表明：在不同的小穗内菌丝增殖

2、的速度不同，该结果为进一步研究该病的发生规律提供了信息。关键词：稻曲病菌；人工接种；PCR；组织观察中图分类号：文献标识码：A文章编号：1672—3538(2009)03．04一O164—03ObservationandDetectionofUstilaginoideavirensinInoculatedRiceSpikeletsCAIHong—sheng．ZHOUYong—li(NationalKeyFacilityforCropGeneticResources&Improvement，InstituteofCropScienc

3、es，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beng100081，China)Abstract：RicefalsesmutcausedbyUstilaginoideayirensisanimportantconstraintaffectingfleeyieldandqualityinChina．Inthisstudy，theproliferationininoculatedricespikeletswasobservedanddetect—edbyhistologicalstainingandP

4、CRanalysis．Theconidiabegantogerminate2daysafterinoculation(dpi)andthehyphaefirstlyattachedtothepollensandthrums，however，nohyphawasobservedonthestigma．Thepollensattachedhyphaecouldbefoundonthe8dpi．ThespeedofhyphaeinspikeletswasdifferentbyhistologicalobservationandPCRde

5、tection．Theseresultswillprovideusefulinformationforbetterunderstandingtheepidemicofthisdisease．Keywords：Ustilaginoideavirens；inoculation；PCR；histologicalobservation稻曲病是一种重要的水稻真菌病害，其致病子，厚垣孢子含有微管蛋白抑制剂，对人体健康极菌[Ustilaginoideavirens(Cooke)Tak．]将稻粒转变为不利，家畜食用污染的谷物还能引起中毒L2。j。

6、成稻曲球，表面覆盖大量粉状、墨绿色厚垣孢20世纪50年代日本最早开始研究稻曲病的子⋯。2O世纪80年代以来，随着杂交水稻、籼粳侵染时期和侵染途径。目前普遍认为稻曲病为单交育成的高产品种的推广和相应增产措施的应循环病害，病菌主要以厚垣孢子在土壤中越冬，在用，稻曲病在我国由次要病害上升为主要病害，目水稻生长季节，稻田水中的厚垣孢子萌发产生分前遍及各主要水稻种植区。稻曲病显著地降低水生孢子侵染水稻。为了进一步研究稻曲病的发病稻产量和稻米品质，发病严重的年份产量损失率机理，我们通过显微观察和分子检测分析了人工达30％以上，并且加工出的稻米

7、混有大量厚垣孢接种后稻曲病菌在水稻穗部的增殖状况，现将结基金项目国家自然科学基金项目(30471021)作者简介蔡洪生，男，硕士研究生，主要从事水稻真菌病害研究。收稿日期2009-O9．O8通讯作者周永力，E-mail：zhouyl@caas．net．cn第7卷第3-4期蔡洪生等：人工接种后稻曲病菌在水稻穗部增殖状况的观察和检测165果报道如下。进行PCR扩增检测病菌在穗部的增殖状况。剪取稻穗的单个小穗，分别置于1．5mL离心管中，1材料与方法加入液氮后迅速用玻璃棒进行研磨，采用文献[7]1．1材料等的方法提取DNA，按照文献[6

8、]的方法进行PCR将田间表现感病的水稻品种“辽粳326”进行扩增。由液体培养的U．viFe／z$菌丝提取的DNA盆栽，用于人工接种试验；供试U．virens菌株从模板作为阳性对照，以未接种的水稻小穗提取的沈阳市东陵区稻田采集的病穗中分离获得。DNA