葛仙米的培养

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1、第28卷湖北师范学院学报(自然科学版)Vol128第3期JournalofHubeiNormalUniversity(NaturalScience)No13,2008葛仙米的培养122222222邱昌恩,王腾,卢高飞,钟小灵,陈志芬,杨敏,田水秀,刘芳,李杨(1.湖北师范学院生命科学学院,湖北黄石435002;2.湖北师范学院生命科学学院2005级学生,湖北黄石435002)摘要:以葛仙米为实验材料,在春季自然温度条件下培养,研究其基本生长情况,形态特征和显微结构的变化。结果表明,在不断更换培养基的条件下,

2、葛仙米生长较快,从生长曲线看最大比生长率出现在培养的第九天;随培养时间的延长,葛仙米的形态结构及颜色都发生了显著变化,可明显观察到异形胞。结果提示,在春季自然温度条件下培养,葛仙米能够正常生长。关键词:葛仙米(Nostocsphaeroideskützing);异形胞;自然温度培养;形态特征中图分类号:Q-34文献标识码:A文章编号:100922714(2008)0320004204葛仙米(Nostocsphaeroideskützing.)是蓝藻门(Cyanophyta)念珠藻科(Nostocaceae)

3、的一种低等的[1]多细胞群体蓝藻,古名天仙菜、天仙米,俗称水木耳。葛仙米是以东晋炼丹术家、医学家、道教理论家葛洪的名字而得名。它与地木耳(Nostoccommunevanch.),发菜(NostocflagelliformeBornetFlah.)[2]为同属植物,其出现时间早于螺旋藻(Spirulinaprincepts)。葛仙米是我国传统出口的一种珍贵野[1]生的食药两用蓝藻。根据《本草纲目》等记载,葛仙米有治疗夜盲症,脱肛,烫伤和兼具美容之功[3]效。据研究,葛仙米不仅蛋白质含量高,蛋白质中的氨基酸品

4、种齐全,结构合理,基本符合FAO/WHO专家委员会于1973年推普的人体必需氨基酸模式,蛋白质质量好,营养价值高为优质蛋白质,而且,葛仙米还富含多糖和具有特殊的保健功能的维生素C、B族维生素、β-胡萝卜素、微量元素等[2]营养成分。湖北省恩施地区是我国葛仙米主要原产地,近年来,由于各种原因导致葛仙米产量大大降低,其主要原因有二个:一是农民不施农家肥而改施化肥,严重污染了土壤,如碳铵等肥料改变了土壤的酸碱性;二是大量使用除草剂,改变了葛仙米赖以生存的生长环境。由于以上原因造成了葛仙[3]米自然资源短缺,甚至有

5、绝迹的可能。因此,进行葛仙米的人工培养技术的研究,具有重大的理论和现实经济意义。[1]葛仙米的人工培养技术已基本成熟,但是对其自然温度条件下的人工粗放培养还没有积累数据。本研究于2008年春季在实验室自然温度条件下对葛仙米进行培养,运用BG11培养基,初步观0察和探讨其生长生理特性及形态结构特征,为今后进一步改良其培养方法提供一定依据。1材料与方法1.1实验材料葛仙米藻种由中国科学院水生生物研究所提供。1.2实验仪器显微镜、灭菌锅、光照培养箱、电子天平。1.3实验方法收稿日期:2008—05—05作者简介:

6、邱昌恩(1966—),男,湖北鄂州市人,博士,副教授,主要从事藻类生物技术及环境生物学研究1·4·©采用固体培养藻种和自然温度条件下液体培养两种培养方式,其中液体培养的藻种来自固体培养(固体藻种培养15d左右后观察到有球体产生即可用于液体培养藻种),接种过程采用无菌操作。两种培养方式的条件如下:固体培养:干藻种复水后,碾磨接种于BG110固体培养基中,于光照培养-2-1-2-1箱中培养,培养温度为25℃、光照强度为35μmolm·s～40μmolm·s、光暗周期比为14∶10(h).自然温度条件下液体培养:

7、将葛仙米固体培养藻种接种于BG11液体培养基中,在2008年春季0-2-1-2-1自然温度条件下,光照强度为70μmolm·s～80μmolm·s,24h光照下通气培养,每9d更换一次培养基,实验观测的培养周期为36d。1.4生物量及生长曲线的测定每9d测一次藻体的生物量(即鲜重),然后测定其生长曲线。以公式μ=(lgN-lgN)/(t-t)00计算比生长率,公式中N、N0分别表示培养终止和起始时的生物量,t、t0分别表示培养终止与起始时间。1.5形态观察每天肉眼观察葛仙米外部形态及其颜色变化,培养第30d

8、显微观察藻体形态结构变化。2结果与分析2.1两种培养方式的生长状况图1葛仙米干藻种经过复水后固体培养7天的生长情况图2葛仙米液体培养一个月的生长情况图[4]3天然野生葛仙米藻种两种培养方式的生长情况见图1、图2。图2与图3比较,在春季自然温度条件下液体培养的葛·5·©[5]仙米形态特征与天然野生的葛仙米形态特征基本一致。本研究实验条件与文献中培养条件有所[4]不同,培养温度为春季自然温度条件;而模拟自然状态下葛仙