疏水-亲水型硅胶固定化葡萄糖氧化酶的研究

疏水-亲水型硅胶固定化葡萄糖氧化酶的研究

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1、第25卷第3期西安交通大学学报(医学版)7ol8259o832004年6月JournalofXi'anJiaotongUniversity(MedicalSciences)Jun82004疏水-亲水型硅胶固定化葡萄糖氧化酶的研究锁爱莉,姚煜,李恩孝(西安交通大学第一医院肿瘤内科,陕西西安710061)摘要:目的评价疏水-亲水型硅胶作为载体固定化葡萄糖氧化酶的性能,以期制备出能用于临床体液中葡萄糖浓度测定的生物传感器。方法以甲基三甲氧基硅(MTMOS)和γ-氨丙基三甲氧基硅烷(APTMOS)为原料,利

2、用溶胶-凝胶技术制成了一种疏水-亲水型硅胶,以1-乙基-3(-3-二甲基氨丙基)-碳二亚胺·盐酸(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)为催化剂,利用葡萄糖氧化酶(GOD)分子中的羧基基团与硅胶中氨基基团间的碳二亚胺偶联反应,实现了GOD在硅胶上的固定化,考察了固定化GOD的基本性质。结果固定化GOD活力最优时的条件如下:APTMOS的体积分数为70%、给酶量为16800U、最适温度和最适pH值分别为35℃和5.5,固定化GOD具有很好的操作稳定性和-1贮存稳定性,其米氏常数Km为9.1mmol·L

3、。结论疏水-亲水型硅胶是一种新型的酶固定化载体,可用于多种酶的固定化。关键词:酶固定化;葡萄糖氧化酶;疏水-亲水型硅胶;偶联反应中图分类号:Q814.2文献标识码:A文章编号:1671-8259(2004)03-0229-04Thestudyofimmobilizationofglucoseoxidaseonhydrophilic-hydropholicsilicagelSuoAili,YaoYu,LiEnxiao(DepartmentofMedicalOncology,FirstHospitalo

4、fXi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061,China)ABSTRACT:Objective:oevaluatet;eidasei==o?ili@edon;ydro<;ilicA;ydro<;o?icsilicagel,B;ic;=ay?ee=

5、reysilane(CD:MES)and=et;yltri=et;o>ysilane(M:MES)?ysolAgeltec;niFue8Glucoseo>idase(GEH)Bascovalentlyattac;edtot;esilicagelviacar?odii=idecouylicacidgrou

6、icagelundert;eysuccini=ide8:;e

7、=econtentgiven16800U,t;ete=inde

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