正交法优化茶籽饼粕中茶皂素提取工艺

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1、第35卷第5期西南民族大学学报·自然科学版JournalofSouthwestUniversityforNationalities·NaturalScienceEdition文章编号：】003-2843(2009)05，1028-04正交法优化茶籽饼粕中茶皂素的提取工艺张苏阳，崔晓燕，邵婧，韩泳平(西南民族大学少数民族药物研究所，四川成都610041)摘要：采用正交实验法，从提取时间、温度、乙醇浓度、液料比4个因素出发对从茶籽饼粕中提取茶皂素的工艺进行了研究．以茶皂素得率和含量为指标，得出茶皂素

2、的最佳提取条件为：浸提时间为5h，浸提温度为70"C，乙醇浓度为80％．料液比为9：1．关键词：正交法；茶籽饼粕；茶皂素；提取条件中图分类号：R284文献标识码：A茶皂素又名茶皂苷，是存在于山茶科植物中的一类五环三萜皂苷类物质，为几种三萜皂甙元与结构糖、结构酸所形成的复杂化合物的混合物．同时是一种纯天然非离子型表面活性剂，易溶于水、甲醇、含水乙醇和正丁醇，难溶于无水乙醇，不溶于乙醚、丙酮及苯等溶剂【l1．具有乳化、分散、去污、消炎、杀菌、发泡、稳泡等多种表面活性，尤其具有很好的发泡和稳泡能力，且

3、不受水质硬度的影响，广泛应用于日用化工、农药、医药、食品、建材等领域【2J．茶籽饼粕即是油茶籽、山茶籽制油后的副产物，我国是产茶大国，茶副产物资源十分丰富，由于茶饼味苦且辛辣、有毒等原因，目前真正得到合理利用的却较少，致使大量茶饼被废弃，造成很大的资源浪费【3】．油茶籽饼粕中茶皂素含量较高，我国油茶资源丰富，油茶籽饼粕产量很高，全国有100万吨左右的油茶饼粕及数十万吨茶叶果的丰富资源，利用起来每年至少可生产30万吨茶皂素I4]．因此如何从茶籽饼中提取茶皂素，对解决茶籽饼综合利用问题尤为重要．本实

4、验在查阅文献的基础上采用正交实验探讨提取时间、提取温度、提取剂浓度、料液比对茶皂素得率和含量的影响，以期得到最佳的提取工艺条件．1仪器与试药1．1仪器JJ—l精密定时电动搅拌器(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司)；721分光光度计(上海第三分析仪器厂)；旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司)；电子天平(METTLERTOLEDOALl04)；DZF．6050型真空干燥箱(上海—恒科学仪器有限公司)；HH．2数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)．1．2试剂石油醚(AR)；95％乙醇；无水乙醇(AR)；正

5、丁醇(AR)；甲醇(AR)；丙酮(AR)；香草醛(AR)；95％浓硫酸(AR)；去离子水．1．3原料茶籽饼粕(产地四川雅安)；茶皂素标准品(实验室自制，经熔点，紫外光谱鉴定)．收稿日期：2009．07．07作者简介：张苏阳(1984．)，女，云南安宁人，西南民族大学少数民族药物研究所硕士研究生．基金项目：教育部留学回国人员科研启动基金(2004527)；西南民族大学青年重点资助项目(05NQZ004)通讯作者：韩泳平(1969．)，男，西南民族大学少数民族药物研究所教授．第5期张苏阳等：正交法优

6、化茶籽饼粕中茶皂素的提取工艺10292方法与结果2．1测定方法的建立采用香草醛．硫酸显色法，以茶皂素标准品为对照品．2．2反应液配制80g／L香草醛溶液：香草醛0．8g溶于10ml无水乙醇；体积分数77％H2SO4：一质_[量"5分聪数舾95％H2SO477ml~lJ23ml000O00去离子水中．∞∞∞02．3标准液配制精确称取经干J燥I叵重的标准样品0．0255g，用体积分数70％乙醇溶解，置于25ml容量瓶中定容，再取5ml，置于10ml容量瓶定容(0．5mg／m1)，摇匀备用．2．4最大

7、吸收波长的确定1取标准溶液0．1mL，准确／Jt1)',．80g／L香草醛溶液0．5ml，于冰水中加入77％硫酸液4ml，摇匀，于60*C加热15min，然后置于冰水浴中冷却10min，取出置于室温下，以试剂为空白，用lcmlzL色皿在紫外．可见分光光度计上扫描，得出最大吸收波长为440nm．2．5标准曲线的绘制分别取标准溶液0．1、0．2、0．3、0．4、O．5ml，置于带塞试管中，并~H70％乙醇至溶液体积为0．5ml，按上述方法加试剂反应后，在最大吸收波长下测定其吸光度，并以吸光度对浓度绘

8、制标准曲线(图1)．其回归方程为Y=0．2162X．0．0056(R=O．9989)．00．050．10．1b0．0．b0．吸光度图1茶皂素的标准曲线2．6方法学考察2．6．1精密度实验对同一茶皂素标准品，连续测其吸光度，重复5次，其RSD为0．54％，结果表明该测定方法精密度良好．2．6．2重现性实验精密称取同一样品5份，按2．4测量其在440nm处的吸光度，RSD=I．76％，结果表明该测定方法重现性良好．2．6．3稳定性实验精密吸取同一茶皂素标准品，按2．4测量其在5min、10min、1