茶籽饼茶皂素提取及抑菌效果的研究-论文.pdf

《茶籽饼茶皂素提取及抑菌效果的研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2014年1月黑龙江生态工程职业学院学报Jan．2014第27卷第1期JournalofHeilongjiangVocationalInstituteofEcologicalEngineeringVo1．27No．1doi：10．3969／j．issn．1674—6341．2014．01．014茶籽饼茶皂素提取及抑菌效果的研究马戎(福建师范大学闽南科技学院，福建泉州362332)摘要：采用有机溶剂法提取茶籽饼中的茶皂素，使用无水乙醇对粗茶皂素进行纯化。经香草醛一硫酸显色，使用紫外一可见分光光度计进行扫描得出最大吸收波长为54Onto。绘制茶皂素定量的标准曲线，测定成品茶皂素的含量为

2、41．9％。以提取的粗制茶皂素为原料，对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌进行了抑茵实验，结果表明均有抑常】作用。关键词：茶皂素；提取；纯化；抑茵中图分类号：TQ423文献标志码：A文章编号：1674—6341(2014)01—0025—03油茶是中国南方丘陵地区普遍种植的一种重要油料作液用保鲜膜封口冷却过夜，待结晶完全析出，抽滤，滤饼放进物。我国是全世界油茶籽产量最高、品种最多、分布最广的真空干燥箱中干燥，称重。国家。目前，我国油茶籽年产量120万吨左右，榨油后剩余1．2．2茶皂素定量分析——香草醛一浓硫酸显色法的茶籽粕60万吨左右⋯。茶籽饼是油茶籽、山茶籽制油后1．2．2．

3、1显色反应的副产物。茶籽饼不能直接作为饲料或者肥料使用，大量饼将自制的茶皂素标准品悬浮于无水醋酸中，滴加浓硫酸粕被废弃，造成资源浪费。从茶籽饼中可以提取茶皂素。茶2—3滴，观察颜色的变化J。皂素是一种性能优良的非离子型天然表面活性剂，具有抗菌1．2．2．28％(w／V)香草醛溶液的配制性、抗氧化性等多种生物活性，可广泛应用到各种行业中。称取香草醛0．80g，倒入10mL容量瓶中，无水乙醇定1材料和方法容，摇匀后备用。1．1材料和仪器1．2．2．377％(V／V)硫酸溶液的配制试验原料：茶枯饼(产地福建三明)，大肠杆菌、芽孢杆将95％(w／w)的硫酸77mL加入到23mL去离子水中，

4、菌、金黄色葡萄球菌(福建师范大学闽南科技学院生化系提放置于冰水中冷却后备用。供)；1．2．2．4标准溶液的配制试验试剂：石油醚，乙醇，无水醋酸，浓硫酸，蛋白胨，琼精密称取茶皂素标准品0．0500g，用50％乙醇溶解，置于脂，氯化钠，氢氧化钠，盐酸，香草醛均为分析纯；50mL容量瓶中定容，摇匀备用。试验仪器：索氏脂肪提取器，RE一2000A旋转蒸发仪，1．2．2．5茶皂素显色反应后最大吸收波长的确定DZF一6021真空干燥箱，wFZuV一2000型紫外一可见分光量取茶皂素标准溶液0．5mL放置于试管中，加入8％香光度计，YP601N电子天平，高压灭菌锅，恒温培养箱。草醛溶液0．5mL

5、，放置于冰水中，加入77％硫酸溶液4mL，摇1．2试验方法匀，60~C水浴中加热20min，冰水浴冷却10min，取出放至室1．2．1茶皂素提取，纯化温。以试剂为空白，在紫外一可见分光光度计上扫描。1．2．1．1粗制茶皂素的提取1．2．2．6标准曲线的绘制取25g茶枯饼粉，加入100mL石油醚，用索氏脂肪提取分别取标准溶液0．0，0．1，0．2，0．3，0．4，0．5mL置于试器在75~C恒温水浴lh，趁热抽滤，烘干。将烘干后的茶枯饼管中，并用75％乙醇分别将体积补充至0．5mL，按1．2．2．5粉以6：l的液固比加入80％乙醇，于75~C水浴搅拌3h。趁热的方法处理。以试剂为空白

6、，在最大吸收波长处测其吸光度抽滤，收集滤液，将滤渣以相同条件再提取1次。合并滤液，值。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。55℃旋转蒸发至一定体积，将浓缩液真空干燥，得粗制茶皂1．2．2．7粗制茶皂素含量测定素。称重。计算茶皂素得率。称取50rag粗制茶皂素，用按1．2．2．5的方法处理。以1．2．1．2自制茶皂素标准品的制备试剂为空白，在最大吸收波长处测其吸光度值。称取粗制茶皂素5．00g，加入50mL无水乙醇，控制溶液1．2．3茶皂素抑菌试验呈微沸状态(78—80~C)，以磁子搅拌水浴2h，趁热抽滤，滤1．2．3．1大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌生长收稿日期：

7、2013—12一O1曲线测定作者简介：马戎(1981一)，男，江苏泰州人，讲师，硕士，将少量细菌接种纯种到一定容积的液体培养基后，在适研究方向：精细化工。宜的条件下培养，定时取样测定细胞数量。由于细菌悬液的一25—浓度与浑浊度成正比，因此可利用分光光度计测定细菌悬液素的含量。的光密度来推知菌液的浓度，将所测得的OD值与其对应的将纯化后的茶皂素粉末悬浮于无水醋酸中，加入浓硫酸培养时间作图，即可绘制出该菌在一定条件下的生长曲2～3滴，则生显红色，并且渐渐变为紫色，现象与茶