磷含量的测定

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1、钼蓝比色法2H4i+f'?/l:[#[  _:C（1）仪器：'e$H'p2y-a,i9d瓷坩锅或石英坩锅、紫外分光光度计、移液管（5ml、10ml）、电炉高温炉、漏斗、容量瓶：100,500,1000ml、表面皿、烧杯、量筒、恒温水浴锅、坩锅、试剂瓶等。4f-G（2）试剂：(?*V!Q!x-L%{a、50%氢氧化钾溶液/盐酸、硫酸、氧化锌、滤纸、0.015%硫酸联氨溶液；8@*{/z"b、2.5%钼酸钠稀硫酸溶液：量取140ml硫酸注入300ml水中,摇匀,冷却至室温，加入12.5g钼酸钠,溶解后加水至500ml,摇匀,静置24小时备用。+k#o&K$d)f&Q9k)X

2、9X5Q!Kc、磷标准溶液：称取无水的磷酸二氢钾0.4391g溶于1000ml水中作为1号液，含磷0.1mg/ml，吸取1号液10ml，加水稀释至100ml含磷0.01mg/ml作为2号液，比色用。'n  n  x4j.{!};i!E!Q（3）操作方法：&K&?'y2e8l.c6z"Z-~a、绘制标准曲线8}5N1_*H4S(Q以吸光值为纵坐标，以磷（0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg）为横坐标绘制标准曲线。比色管号124682号标准液/ml12468蒸馏水/ml98642硫酸联氨溶液（5%）8ml钼酸钠稀硫酸溶液2ml加塞摇匀，去塞，置于正在沸腾的水

3、浴中加热10分钟，取出冷却至室温，↓用水稀释至50ml，充分摇匀10min分光光度计计在波长650nm测定吸光值7I7r+i  o:^b、制备被测液:用坩锅称取试样约10g(准确至0.001g)，加氧化锌0.5g，先在电炉上加热炭化，然后送入550～600℃的高温炉中灼烧至灰化(白色)，灼烧时间约2小时,取出坩锅在干燥器中冷却至室温，用热盐酸(1:1)10ml溶解灰分，并加热微沸5分钟，将溶解液过滤，注入100ml容量瓶中，用热水冲洗坩锅和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50%氢氧化钾溶液中和至出现浑浊，缓慢滴加盐酸使氢氧化锌沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀释至刻度，摇

4、匀。"0m2c、比色：8M'T:E"S9J用移液管吸取被测液10ml注入50ml比色管中,加入0.015%硫酸联氨8.0ml，加2.0ml钼酸钠稀硫酸溶液，加塞,摇匀,将比色管置于正在沸腾的水浴中加热10分钟,取出冷却至室温，用水稀释至50ml充分摇匀，经10分钟后，用分光光度计在650nm下，用1cm液槽，用水调整零点,测定消光值。*]%*Q6g'h8y;l9d、结果计算：5Y4v2]$s:N1Q0]根据被测液的消光值，从标准曲线查得磷量(p)，按公式计算磷脂含量微波消解-分光光度法测定食品中磷试剂:1、硝酸,优级纯。2、15%(v/v)硫酸溶液。3、50g/L

5、钼酸铵溶液:(取5g钼酸铵固体,用15%的硫酸溶液稀释至100ml。)4、200g/L亚硫酸钠溶液:(根据每次的使用量,称取一定量的亚硫酸钠固体,溶解到相应的蒸馏水中即可)(每次使用前临时配制)。5、对苯二酚溶液:取0.5g(对苯二酚固体溶解并定容到100ml并在配好的溶液中加入一滴浓硫酸。)6、磷标准贮备液(1000ug/ml):称取预先在105℃干燥至恒重并保存于干燥器中的磷酸二氢钾(优级纯)0.4393g溶解于蒸馏水中,并定容至1000ml。7、磷标准使用液(10ug/ml):取磷标准贮备液进行逐级稀释,使最后浓度为10ug/ml。仪器微波消解炉、内衬杯、分光光度

6、计标准曲线的制备：分别吸取磷标准使用液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml至8支10ml比色管中,依次加入1ml钼酸铵溶液、0.5ml亚硫酸钠溶液及0.5ml对苯二酚溶液,加蒸馏水定容到10m,l摇匀,静置30min,在波长660nm处测定其吸光度,根据测定值绘制标准曲线。参考文献：[1]姚祖江.微波消解测定食物中磷含量.食品科学,2010(13):326-328[2]李淑敏,应波.微波消解-分光光度法测定食品中磷.中国卫生检验杂志,2005,11(15):1295-1297.中华人民共和国国家标准食物中磷的测定方法原理食品中的有机物经酸破

7、坏以后，磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。用氯化亚锡、硫酸肼还原磷钼酸铵生成蓝色化合物——钼蓝。蓝色强度与磷含量成正比，可进行比色定量。试剂1硝酸。2硫酸：比重1.84。3高氯酸。415%硫酸溶液：取15mL硫酸，加入到80mL水中，混匀。放冷以后用水稀释至100mL。55%硫酸溶液：取5mL硫酸，加入到90mL水中，混匀。放冷以后用水稀释至100mL。63%硫酸溶液：取3mL硫酸，加入到90mL水中，混匀。放冷以后用水稀释至100mL。7钼酸铵溶液：称取5g钼酸铵[（NH4）6Mo7O24·4H2O]用15%硫酸稀释至100mL。