《全血胆碱脂酶测定》PPT课件

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1、全血胆碱酯酶活性的测定——三氯化铁比色法有机磷农药的简单回顾全血胆碱酯酶活性测定概述三氯化铁比色法有机磷农药organophosphorouspesticide接触机会生产施用食物误服、自杀毒作用机制抑制体内胆碱酯酶（ChE）活性使体内乙酰胆碱大量积聚，引发神经系统功能紊乱乙酰胆碱胆碱酯酶有机磷农药诊断《职业急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准》(GBZ-2002)职业史现场职业卫生调查临床症状体征实验室检查——全血胆碱酯酶（ChE）活性诊断分级标准全血ChE活性范围急性轻度中毒---50%-70%急性中度中毒---30%-50%急性重度中毒---30%以下实验目的加深对有机

2、磷农药中毒机制的认识掌握全血ChE活性测定的意义掌握全血ChE活性测定原理、方法意义有机磷农药中毒的重要诊断指标中毒者治疗后的效果观察指标接触有机磷农药人员健康状况的动态观察指标方法Asch-DTNB比色法（GBZ52）三氯化铁比色法溴麝香草酚蓝（B·T·B）比色法纸片法Biocheck法（便携式分析仪）三氯化铁比色法[原理]乙酰胆碱胆碱酯酶胆碱+乙酸碱性羟胺乙酰羟胺HClFeCl3羟肟酸铁(棕红色络合物)[器材]刺针一次性自控式微量吸管（20μl）分光光度计恒温水浴箱（37℃±0.5℃）[试剂]磷酸盐缓冲液（PH=7.20）碱性羟胺溶液1∶2盐酸溶液10%三氯化铁溶

3、液乙酰胆碱标准应用液（1ml含4μmol）[分析步骤]1.乙酰胆碱标准曲线的绘制2.样品测定1.乙酰胆碱标准曲线的绘制（1）取六只具塞试管，配制乙酰胆碱标准色列管号123456乙酰胆碱标准应用液（ml）00.20.40.60.81.0水（ml）111111磷酸盐缓冲液（ml）10.80.60.40.20乙酰胆碱含量（μmol）00.81.62.43.24.0（2）各管加碱性羟胺4ml，立即振摇3min（3）各管加1∶2盐酸溶液2ml，振摇1min（4）各管加10%三氯化铁溶液2ml，摇匀，过滤（5）测吸光度：λ——520nm，参比管——第1管（6）绘制标准曲线2.样品

4、测定A管（样品管）B管（对照管）0.98ml磷缓0.98ml磷缓20ul血20ul血37℃水浴5min碱性羟胺4ml,振3min乙酰胆碱标准应用液1ml乙酰胆碱标准应用液1ml37℃水浴30min碱性羟胺4ml,振3min1∶2盐酸溶液2ml,摇1min10%三氯化铁溶液2ml摇匀、过滤、比色计算1.被水解的乙酰胆碱吸光度=对照管吸光度（B管）－样品管吸光度（A管）2.查标准曲线，得出被水解乙酰胆碱（μmol）---即0.02ml血经37℃，30min反应条件下的胆碱酯酶活性绝对值C3.胆碱酯酶活性相对值（%）浙江地区健康人胆碱酯酶活性绝对值男：3.22±0.336μ

5、mol女：3.19±0.398μmol注意事项采血前先准备好试管，加入磷缓采血时严格消毒，用过的棉球、刺针集中放置准确控制水浴温度和放置时间加三氯化铁显色后，在20min内比色参比管的溶液留用到最后实验报告要求[实验目的][实验原理][实验步骤][实验结果][分析与讨论]