《实验室诊断》PPT课件

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1、第四章实验室检验技术血液检验1、血液样本的采取采血的部位和方法，根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同，可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。毛细血管采血法除血沉测定和红细胞压积测定需较多量血液外，其他各项测定均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管采血。采血前先剪毛，酒精棉球消毒，待酒精挥发后，用消毒的干燥的针头迅速刺入2~3mm深，让血液自然流出，且勿挤压以免混入过多组织液。流出的第一滴血，可用于制作血片，然后用干棉球擦去局部的剩余血液，用流出的第二滴血液作红、白细胞计数和血红蛋白测定，若利用第三滴血

2、时，仍要将第二滴血擦干，否则流出的血不能形成滴状，不易吸取。静脉采血法犬、猫可于小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉采血。局部剪毛消毒，用止血带扎住采血部上端，使静脉怒张，用消毒、干燥的注射器接上针头，针头斜上面刺入静脉采血，待抽至所需量后，先放松止血带，再用消毒棉球按住伤口，拔出针头。除去针头，将血液缓缓注入清洁的试管内。需抗凝血液时，试管内加抗凝剂，并立即混匀，以免凝固。第一节血液检验（1）．后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血（2）．股动脉采血（3）.心脏采血同大、小鼠心脏采血（4

3、）．耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱、血液pH值以及K+、Na+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；采血用具有采用部位一般

4、需要进行消毒；采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。采血时要注意取少量血，犬猫耳静脉。取中量血：ａ．后肢外侧皮下小隐静脉ｂ．前肢内侧皮下头静脉ｃ．颈静脉取大量血ａ．股动脉、颈动脉最多狗100ml、猫10mlｂ．心脏血液检验血液的抗凝草酸钠是常用的抗凝剂，每1.5~2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响，故不能用红细胞压积测定，如测定红细胞压积时，可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。双草酸盐抗凝剂草酸钠0.8g草酸铵1.2g

5、蒸馏水加至100ml溶解后吸取0.5ml，加入供采血试管或小瓶中，置干燥箱内（温度不超过80℃）烘干备用，可供5ml全血抗凝。血液检验乙二胺四乙酸二钠（EDTA－Na2）每10mg可使5ml全血抗凝；或配成10%的溶液，每2滴可使5ml全血抗凝。可适用于一般的血液学检查，特别是血小板计数，但因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，不适合于血象及血小板功能检查。3.8%枸橼酸钠溶液每0.5ml可使5ml全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能检查。因其毒性小又可作为血液保养液。但不适用于血液化学检验。由于抗凝

6、剂溶解缓慢，故只能配成溶液，不能用粉剂。血液的抗凝血液检验肝素肝素价格最贵，其优点是抗凝作用强，不影响血细胞的体积，不致溶血等，可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少，故不适用于白细胞和血小板计数，也不适用于血涂片检查，因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景，更不能用于凝血象的检查。血液的抗凝通常用肝素粉剂配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶内，放于37～50℃中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml血液不凝固，肝素抗凝剂应及时使用，放置过久易失效。怀疑传染病时，采血应防

7、止到处流散，检后残余血液及所用器皿应进行消毒处理。血液检验红细胞沉降率测定魏氏法魏氏血沉管长30cm，内径2.5mm管上有0~200的刻度，每一刻度的距离为1mm，其溶积为1ml。先向10ml刻度试管中加入3.8%枸橼酸1ml，再自静脉采血4ml，颠倒混合数次，然后用魏氏血沉管吸取抗凝剂至刻度0处，擦去管外血液，在室温条件下，垂直放于血沉管架上，经15、30、45、60min，分别观察并记录细胞沉降数值。血液检验红细胞沉降率测定“六五”型血沉管法“六五”型血沉管法内径0.9cm，全长17~20cm，管上有

8、100个刻度容积为10ml。于血沉管中加入抗凝剂（草酸钠0.015~0.02g，枸橼酸钠粉末0.04~0.05g）,自颈静脉直接采血至刻度“0”处，立即充分混合，于室温垂直立于试管架上，镜15、30、45、60min各观察一次，并记录红细胞沉降的数值。血液检验血红蛋白测定红细胞遇酸溶解，游离出血红蛋白，并被酸化为褐色的酸性血红素，稀释后与标准色柱比色，即可求得血红蛋白的含量。血红蛋白试纸测定法器材应备有测定血红蛋白试纸和4g%