植物组织培养---绪论

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1、植物组织培养技术第一章绪论一、植物组织培养的概念(一)概念植物组织培养(Planttissueculture)广义上是指无菌条件下,在特定的培养基上对离体的植物器官、组织、细胞和原生质体甚至包括完整植株进行培养的技术。(二)主要特征1在培养容器中进行;2无菌培养环境,排除了微生物如真菌、细菌以及害虫等的侵入;3各种环境因子如营养因子、激素因子以及光照、温度等物理因子处于人工控制之下,并可达到最适条件。4通常打破了正常的植物发育过程和格局;5随着单细胞和原生质体培养技术的发展,对植物显微结构进行操作成为可

2、能。(三)植物组织培养类型:根据不同分类的依据可以分为不同类型。1.根据培养材料不同分为:完整植株培养(PlantCulture):对幼苗和较大植株等的培养。胚胎培养(EmbryoCulture):包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。器官培养(OrganCulture):包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。组织培养(TissueCulture):如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。细胞培养(CellCulture):指对单细胞或较小的细胞团进行培养。原生质体培养(ProtoplastCult

3、ure):指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。矮牵牛茎尖离体培养培养牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖Matureembryocultureandrapidpropagationoftreepeony微型月季茎段离体培养花烛叶片离体快速繁殖大蒜根尖培养及植株再生大蒜试管鳞茎诱导人参细胞悬浮培养非洲紫罗兰原生质体分离、培养及植株再生2.根据再生途径分为:◆器官发生途径(Organogenesis):直接器官发生途径:植物器官可以直接由外植体上诱导。如茎尖培养。间接器官发生途径:成熟细胞经过脱分化(ded

4、ifferentiation)及再分化(redifferentiation)过程而形成新的组织和器官的过程。如叶片培养。◆体细胞胚胎发生(Somaticembryogenesis):体胚发生途径是指二倍体或单倍体的体细胞在特定条件下.未经性细胞融合而通过与合子胚发生类似的途径发育出新个体的形态发生过程。经体胚发生形成类似合子胚的结构称为胚状体(embryoid)或体细胞胚(somaticembryo).直接器官发生间接器官发生体细胞胚胎发生贯叶金丝桃不定芽直接再生过程优化培养基无蔗糖1%蔗糖5%蔗糖无B

5、APBAP0.1mg/lBAP5.0mg/l无NAA非洲紫罗兰叶片培养优化培养基无蔗糖1%蔗糖5%蔗糖无BAPBAP0.1mg/lBAP5.0mg/l无NAA台湾百合离体培养大花蕙兰原球茎增殖与植株再生器官发生途径(原球茎的形成):大蒜愈伤组织培养日本牵牛花的离体培养禾本科牧草的体胚发生过程菊花体细胞胚胎发生及植株再生大蒜体细胞胚胎发生过程人工种子(Artificialseed,SyntheticSeed):是指植物离体培养产生的胚状体或不定芽被包裹在含有营养和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能

6、发芽出苗的颗粒体。作为繁殖材料。3.根据培养基的类型分为:固体培养(Solidculture):琼脂、卡拉胶等固化。半液半固体培养(SemisolidCulture):固液双层。液体培养(LiquidCulture):震荡、旋转或静置培养。液体培养的优点:A不使用凝固剂,节约生产成本B营养吸收充分;C操作过程简化。固体培养:液体培养体胚液体培养不同类型液体培养装置液体培养体系菠萝种苗液体培养系统丹参毛状根培养分类属性培养类型按培养材料按培养方式器官培养胚胎培养组织培养细胞培养原生质体培养液体培养固体培养

7、二、 植物组织培养发展简史1、理论准备阶段(探索阶段)(20世纪30年代前)①1667年,虎克(R.Hooke)发现细胞;1756年,Duhamel发现了愈伤组织形成。②1838—1839,Schleiden(1838施莱登提出植物细胞学说)和Schwann(1839年施旺认为细胞学说也适用于动物)创立了细胞学说。③1902年德国的Haberlandt(哈布兰特):“植物离体细胞培养试验”。提出了高等植物的器官和组织可以不断分割、直至单个细胞,并大胆提出在试管培育植物,预言离体细胞在生理、发育上有潜在的

8、全能性。即:所有植物的细胞在适当的条件下具有不断分裂和繁殖并发育成独立个体,可增殖,具有分化为完整植株的潜在能力。Cell有全部遗传信息和发育成完整植株的能力,但处于完整植株的生活细胞受整体Cell控制(即gene受阻orother发挥作用),完整植株上Cell细胞只表达一定形态生理功能。上述阶段仅是探索,没有实质上进展,主要受当时理论水平、科研和设备条件的限制,未诱导出完整植株。2、发展时期(奠基阶段,30年代中至50年代末)组培的真正建

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