分子生物学大题整理——马显才

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1、按照2011年向前整理：1.简述RNA聚合酶II中的CTD序列在转录过程及转录后修饰中的作用。解释：RNA聚合酶II最大亚基末端的羧基端结构域（CTD）是由以七个氨基酸（Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser）为重复单位的高度保守的重复序列组成的。主要作用有一下几个方面：①CTD可以接受转录因子TFIIH的磷酸化作用，使得RNA聚合酶从PolIIA状态转变为PolIIO状态，最终导致转录起始过渡到转录延伸阶段；②CTD参与新转录出的mRNA5’端帽子的加工，它可以作为一个停靠点，募集加帽酶中诸如鸟苷酸转移酶、甲基转移酶等，并且这种加工作用在RNA聚合酶转录合成出25

2、~30个核苷酸时便已经开始，属于共转录过程之一；③CTD还参与mRNA5’→3’间的剪接过程，CTD可以作为剪接体的一个组装位点，使得剪接因子能够快速识别mRNA上面的内含子序列，介导包括可变剪接在内的剪接过程；④CTD序列还参与到mRNA多聚腺嘌呤核苷酸的合成过程，和加帽过程一样，CTD也是作为poly（A）聚合酶等酶停靠的位点，从而易于迅速的识别找到聚腺苷酸化信号，并且启动加尾过程。2.蛋白质合成中是如何保证其翻译的正确性？解释：①首先起始过程具有具有“第二遗传密码”保证机制。在tRNA的识别过程中，tRNA可以专一的和某一种氨基酸向识别结合，同时，氨酰tRNA合成酶也具有高度

3、的专一性，氨酰tRNA合成酶的专一性很高，共有20种，每一种只用于单一种氨基酸与相应tRNA的结合；tRNA上的某些结构特征能使它在氨酰tRNA合成酶的催化下，与特定的氨基酸结合；这些结构特征就是“第二遗传密码”（thesecondgeneticcode）；“第二遗传密码”常在tRNA的受体茎（acceptorstem）上，但在其他区域的也有不少；“第二遗传密码”较复杂，且是非简并的,但专一性同样很强。②在延伸过程中，氨酰tRNA结合到核糖体的A位中的过程具有校对功能，如错误的氨酰tRNA进入了A位（反密码子与密码子不能很好配对），可进行校正，当配对正常时，GTP可以水解从而使EF

4、-Tu从A位点离去，但是当配对不正常时，GTP将无法水解，于是平衡向着核糖体和GTP-EF-Tu-aa-tRNA三联复合物解离的方向移动，完成校对作用；③在终止的过程中，翻译到达终止密码子后，释放因子及GTP结合到核糖体的相应位点，促使肽链与tRNA的连结断开；接着释放因子和tRNA从核糖体解离（这一过程需GTP水解）；最后，核糖体与mRNA解离，核糖体大小亚基解离。3.什么是选择性剪接？具有什么生物学意义？解释：定义：一个基因转录出来的RNA前体，通过不同的剪接方式（选择不同的外显子）而形成不同的成熟mRNA，产生不同的蛋白质。意义：①通过选择性剪接，可对基因的表达起一定的调控作

5、用。选择性剪接常用于在不同的组织或发育时期产生组织特异或调控发育的蛋白质；②选择性剪接还可有重要的生物学效应，如在果蝇的性决定体系中起重要的作用。4.简述乳糖操纵子的组成及其表达调控的机制。解释：组成：lacZ:b-半乳糖苷酶（b-galactosidase）基因lacY:半乳糖苷透过酶（galactosidepermease）基因lacA:半乳糖苷乙酰基转移酶（galactosidetransacetylase）基因lacI:调节基因（regulatorygene）Operator:操纵区Repressor:阻遏子（阻遏物）Inducer:诱导物（异构乳糖，allolactose

6、）调控机制：①阻遏物的负调控机制：A.当没有乳糖时，阻遏物将阻止启动子下游的链被打开。B.当有乳糖时，inducer（乳糖）将和阻遏物结合，导致阻遏物无法结合到启动子下游的序列。②CAP-cAMP的正调控机制：A.cAMP在细胞中的浓度与葡萄糖的含量成反比，它与一种称为代谢物激活蛋白（cataboliteactivatorprotein，又称CAP，另一称呼是环腺苷酸受体蛋白：cAMPreceptorprotein，CRP）一起，起到正调控作用。因此，起正调控作用的是CAP-cAMP。B.乳糖操纵子的启动子实际上是一种弱启动子，其-35box与原核启动子相应的共同序列相差甚大，因此

7、才需要CAP-cAMP进行正调控；如果是强启动子（与共同序列十分相近），则不需要正调控，但这种情况会使得即使葡萄糖存在，乳糖操纵子也一样运作。C.通过对有关突变体进行分析，发现CAP-cAMP的结合位点在启动子的上游（与启动子紧密相邻），该位点称为激活物位点（activatorsite）。CAP-cAMP结合到激活物位点后，就会促进RNA聚合酶与DNA形成openpromotercomplex（CAP-cAMP能加快closedpromotercomplex的形成，从