植物的组织培养

《植物的组织培养》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、实验11植物的组织培养植物的离体器官、组织和细胞在人工控制的环境下培养发育成完整再生植株的技术。基础回顾植物组织培养的过程：植物组织培养的原理全能性的原因细胞分化的概念细胞分化的实质分化程度和分化能力比较去分化和再分化植物组织培养的应用愈伤组织形态发生方式不定芽方式：由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构进而长成完整的植株，这种由愈伤组织中的薄壁细胞不经过生殖过程，直接产生类似于胚的结构，叫做胚状体在某些条件下，愈伤组织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，再逐渐形成芽和根胚状体方式：胚

2、状体山东省青岛第二中学姜洪顺脱分化与再分化愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。脱分化：一个成熟细胞转变为分生状态的过程即形成愈伤组织叫脱分化。再分化：愈伤组织内的细胞具有异质性，能重新分化成各种类型的组织细胞。①快速繁殖植物组织培养技术的应用②借助于组织培养生产人工种子，解决某些作物品种繁殖力差、结子困难或发芽率低等问题。③生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。④转基因植物的培育、单倍体的培育、⑤植物去病毒1.进行菊花的组织培养2.尝试植物

3、激素的应用.实验原理离体的植物细胞、组织、器官，在一定条件下能表达出其细胞的全能性，即发育为完整植株。防止外植体带菌、保证培养基及接种器具彻底灭菌、严格遵守无菌操作规程植物组织培养的条件无菌环境含有全部营养成分的培养基一定的光照适量空气适合的PH、温度植物激素比例合适适宜的外植体MS培养基细胞分裂素和生长素外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化MS培养基1、辨别五大营养物质2、与LB培养基的比较3、与植物无土栽培培养液的比较MS培养基思考：高等植

4、物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？答案：此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养植物激素主要是生长素和细胞分裂素植物激素和人工合成的植物激素天然植物激素人工合成的植物激素类似物生长素萘乙酸（NAA）细胞分裂素苄基腺嘌呤（BA）每一种激素的使用量、不同激素的配比思考：在培养基中有有机营养，培养过程中为什么需要进行光照？答案：在培养过程中，是脱分化、再分化的过程。前期，光照能诱导分化过程，后期，随着芽和根的形成，具有

5、了自养的能力，需要光照进行光合作用。菊花的组织培养步骤步骤制备MS固体培养基外植体切取/消毒接种生芽培养生根培养移栽、炼苗定植70%酒精浸泡10min—5%次氯酸钠浸泡5min(连续2次)—无菌水冲洗配制母液配制发芽、生根培养基灭菌切取接种试管苗的炼苗当小苗生根成为完整的再生植株后，可以出瓶种植。由于环境有很大的改变，首先要进行炼苗，使之适应外界环境。1）开盖，保持小苗的水分供需平衡2）放置在与种植环境相一致的的光、温条件下。3）防止菌类滋生。定植经过锻炼的小苗，可以和一般植物一样进行大规模栽培。污染途径1

6、、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁无菌技术1、培养基的灭菌；（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒；（酒精、次氯酸钠或氯化汞、无菌水）3、接种的无菌操作；（酒精、酒精灯——灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。一些设备培养室在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物质，这些营养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它

7、们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。8．（2010·安徽理综，31Ⅱ）草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：外植株→愈伤组织→芽、根→植株请回答：①②③（1）微型繁殖培育无病毒草莓

8、苗时，一般选取作为外植体，其依据是。（2）在过程①中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和，在配制好的培养基中，常常需要添加，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后2~5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是。（3）在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是。茎尖、根尖不含病毒有机物植物激素外植体消毒不彻底培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低1